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上海科梦达生物
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72-57-1
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5g
级别:AR
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文献和实验问: 现在刚刚开始做干细胞,想自己计数白细胞,用的是Sigma的0.4%台盼蓝,1:1混合,从2分钟开始细胞死亡越来越多,例如2分时有10%死亡,到5分钟就死一半了,到底是几分钟计数最准确呢?& 还有一个问题,看到有1:1使用,也有1:9的,用哪种浓度最好呢? 答1 :0.4%应该是1:1混合的,1:9的是4%浓度的,这个染色的时间不应该太长的,因为对于胎盘蓝这种大分子,不能渗透就如细胞膜,但是如果染色
细胞悬液,置于50ml离心管中,避免将纤维性杂质移入离心管。200g离心5min以洗涤细胞。采用“去除脾脏细胞悬液中的红细胞”的方法裂解红细胞,或使用Tris/NH4Cl裂解缓冲液。每个脾脏的细胞用1ml HBSS/3%(V/V)FBS混悬。 3. 用台盼蓝拒染法计数活细胞。用HBSS/3% FBS混悬细胞至5×107 个细胞/ml。置于冰上保存。 4. 制备下述单克隆抗体的10×混合溶液(10×每种抗体的饱和浓度): GK1.5(抗CD4) 35-6.72(抗CD8) M5
材料1、实验动物孕13d的昆明种二级小鼠。2、主要试剂主要试剂 来源DMEM/F12 GIBCOrh-EGF peprotechrh-bFGF peprotechB-27 supplement GIBCOHEPES SigmaTrypsin SigmaPloy-L-lysine Sigma胎牛血清(FBS) 杭州四季青公司青霉素 华美链霉素 华美胰酶阻断剂(STI) GIBCO葡萄糖 药剂科制剂室台盼蓝 西安化学试剂厂蔗糖 西安化学试剂厂酚红 西安化学试剂厂KH
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