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镍柱亲和层析固定相


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文献和实验关于亲和层析树脂的洗脱缓冲液 一种简单的亲和纯化方法 层析分离带(His)6标签的重组蛋白 Ni柱纯化1 镍柱纯化选择 镍柱纯化2 组氨酸的蛋白在8M尿素中变性纯化 硫铵沉淀后能直接用镍柱作纯化吗? GST融合蛋白挂不上 蛋白纯化讨论(亲和) Con A sepharose 用GSTrap FF 1ml 柱纯化融合蛋白 抗体与Superdex的偶连 如何纯化生物素标记的IgG PhosphoProtein
相关专题 1、问:我用毕式酵母表达一个27KD的蛋白,小量表达并做SDS-PAGE有一条类似三聚体的条带。用大量表达,表达上清用镍柱进行亲和层析 ,在FPLC上可以看到一个大峰,但跑电泳却没有发现条带,为什么呢?请赐教 参考见解:你在大量表达后有没有跑电泳检测?表达上清用镍柱亲和层析 后洗脱液有没有电泳检测?你首先要做的是:1,确定你的蛋白确实有表达;2,亲和层析是表达的蛋白确实被洗脱下来了.然后再考虑FPLC的事
。 (2)分配层析:利用两相中的分配系数不同。 分配系数:当一种溶质在两种给定的互不相溶的溶剂中分配时,在一定温度下达到平衡后,溶质在两相中的浓度比值为一常数,即分配系数(Kd) Kd=Ca / Cb Ca和Cb分别代表某一物质在互不相溶的两相,A相(动相)和B相(静相)中的浓度。 (3)离子交换层析:固定相是离子交换剂,各组分与其亲和力不同 (4)凝胶层析:固定相是多孔凝胶,根据流动相中溶质的分子量大小差异进行分离 (5)亲和层析:利用固定相载体表面偶联具有特殊亲和
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