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噬菌体展示抗体库构建
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艾柏森
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文献和实验关于动物免疫,在多抗制备一部分里有一些讲解(点击这里查看),这里只简要讲述一下单抗制备中需要注意的几个问题。在概述部份已经讨论过,用来制备单抗的动物主要有小鼠、大鼠和兔,由于小鼠易饲养、小鼠单抗技术成熟、路线简单,因此是制备单抗使用的主流动物,这里主要以小鼠单抗制备展开讲述。 免疫途径和周期:单抗制备中,免疫动物的方式一般第一针采用皮下免疫,后面的加强免疫采用腹腔免疫、腘内免疫、皮下免疫或者脾内直接免疫。首次免疫和加强免疫结束后,在融合前三天一般还要进行一次冲击
制备好抗原后,就要进行动物免疫了,免疫这一步除了动物自身的因素外,实验者也要有良好的计划才能得到更好的免疫效果。这里就几个常见的问题作一下简单的讨论。 动物的选择 常见的可以用来制备抗体的动物有:小鼠(Mouse)、大鼠(Rat)、豚鼠(Guinea pig)、仓鼠(Hamster)、兔(Rabbit)、绵羊(Sheep)、山羊(Goat)、马(Horse)、驴(Donkey)、奶牛(Cow),还有的还用鸡或者鸭的。选择动物无非就是考虑两个问题,第一个问题是能否具有较好
1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例)动物 抗原量兔子 20-200ug小鼠 2-40ug大鼠 10-50ug绵羊 100-1000ug母鸡 20-200ug单位:微克4、免疫方案(以免疫兔子为例):天数 0 14 28 38 56 66 87注射 x
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