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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
iFluor® 488-Concanavalin A Conjugate
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
1mg
| Ex (nm) | 491 | Em (nm) | 516 |
| 分子量 | N/A | 溶剂 | Water |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
刀豆蛋白A（ConA）是一种凝集素，它与各种糖、糖蛋白和糖脂中的某些结构特异结合。Con A是一种T细胞有丝分裂原，它能免疫系统，募集淋巴细胞并诱导细胞因子的产生。除了有丝分裂活性外，ConA还可以通过线粒体介导的细胞凋亡和自噬诱导细胞程序性死亡。ConA还被报道NFAT（活化T细胞的核因子），NFAT是一个转录因子家族，在免疫系统的发育和功能中起重要作用，包括T细胞受体（TCR）的参与。ConA广泛应用于生物学和生物化学中，用来表征细胞表面的糖蛋白和其他含糖物质。还可用于凝集素亲和层析纯化糖基化大分子，以及研究各种免疫细胞的免疫调节作用。ConA在B-聚糖分支结构的末端位置特异性地结合α-D-甘露糖基和α-D-葡萄糖基残基（仅在碳2上的醇中不同的两个己糖）。它有4个结合位点，对应于4个亚单位。刀豆蛋白A（conA）是细胞生物学中应用广泛的凝集素之一。iFluor 488-刀豆蛋白A(ConA)缀合物选择性地结合到A-甘露吡喃糖基和A-葡萄糖吡喃糖基残基上，发出明亮的绿色荧光。，为您提供优质的iFluor 488-刀豆蛋白A(ConA)缀合物。
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适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | FITC 滤波片组 |
| Em： | FITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品实验方案
储备溶液配制
iFluor 488-刀豆蛋白 A 原液（200X）
在产品瓶中加入 500 μL 的 ddH2O，制成 2 mg/mL 原液
注：重构的偶联物溶液可在 2-8 °C 下短期保存或在 -20 °C 下长期保存
工作溶液配制
iFluor 488-刀豆蛋白 A 工作溶液（1X）
将 5 μL 的 200X 储备液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中
注：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。推荐的活细胞起始浓度为 5-10 μg/mL
操作步骤
活细胞染色
1.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
2.添加 100 µL iFluor 488-刀豆蛋白 A 工作溶液。
3.用刀豆蛋白 A 结合物工作溶液在 37 °C 下孵育细胞 10-30 分钟。
4.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
5.使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。
固定细胞染色
1.在 PBS 中用 4% 甲醛固定细胞。
注：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后的透化步骤会导致细胞内隔室染色，例如高尔基体和内质网 (ER) 结构。
2.添加 100 µL iFluor 488-刀豆蛋白 A 工作溶液。
3.将细胞与刀豆蛋白 A 工作溶液在室温下孵育 10-30 分钟。
4.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
5.使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。
参考文献
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文献和实验&Tag 技术混淆，CUT&Tag 技术在异染色质位点上有很好的结果，Henikoff 推荐的阳性对照就是存在于异染色质区域的 H3K27me3，且我们的客户在 H3K27me3 以及 H3K27AC 上都有很好的结果。 4. ConA beads 的作用是什么？如果没有 ConA beads ，能否用离心法代替？ ConA beads 是经过 Concanavalin A（刀豆蛋白A，ConA）包被的磁珠。ConA 是一种从刀豆和豌豆等籽粒中提取出来的植物
一、原理淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下，产生增殖反应，DNA和RNA合成明显增加，如在培养液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。二、仪器和材料RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯基乙醇（2-ME）、青霉素、链霉素、刀豆蛋白A（ConA）、Hank's液、PBS缓冲液（pH7.2-7.4）、3H-TdR、闪烁液[2，5-二苯基恶唑（PPO）0.5g、1，4-双-（5-苯基恶唑基）-苯
[试剂与仪器](1)RNA提取试剂：TRIZOL试剂(GibcolNo15596-026)(2)DEPC处理的双蒸水，乙醇(3)RPMI-1640，胎牛血清(FCS)，ConA(刀豆蛋白A)(4)CO2培养箱(5)无菌操作台和离心机等 [操作步骤](1)收集培养细胞，用RPMI-1600培养液离心洗涤3次，第二次离心洗涤时用RPMI-1640培养液调整细胞数至5×106~1×107细胞(2)最后一次洗涤时吸1ml细胞悬液至1.5mlEP管中，在台式离心机离心，弃上清加入
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