- ￥1600
- 昂羽
- 中国
- G6034-50
- 2026年02月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 运输方式：
干冰
- 规格：
50×50ul
产品线有：克隆 热激 感受态细胞、 克隆 电击 感受态细胞、 表达 热激 感受态细胞、 发根 农杆菌 化转 感受态细胞、 发根 农杆菌 电击 感受态细胞、 农杆菌 化转 感受态细胞、 农杆菌 电击 感受态细胞、 酵母 感受态细胞
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文献和实验试剂准备： LB培养基: 500mL 双蒸水：600mL 高压灭菌 预冷 10%甘油：1000mL 预冷 250ml离心杯：高压灭菌 预冷 50mL离心管数个，250mL摇瓶4个，1.5mL EP管 高压灭菌 制备步骤： 1、接种原代菌（DH5α或DH10B），次日挑取单菌落，放入1mL LB培养基中，37℃，300rpm，6 hr
2. 取1 μl 纯化后的质粒于一1.5ml的离心管中，将其和0.1CM的电极杯一起置于冰上预冷。 3. 将40～100ul解冻的感受态细胞转移至此1.5ml 的离心管中，小心混匀，冰上放置10min。 4. 打开电转仪，调至Manual，调节电压为2.1KV。 5. 将此混合物转移至已预冷的电极杯中，轻轻敲击电极杯使混合物均匀进入电极杯的底部； 6. 将电极杯推入电转化仪，按一下pulse键，听到蜂鸣声后，向电击杯中迅速加入1000μl的SOC液体培养基，重悬
体外连接的DNA重组分子导入合适的受体细胞才能大量增殖。为了提高受体菌摄取外源DNA的能力，提高转化效率以获得更多的转化子，人们摸索出了不同的方法处理细菌，使其处于感受态。目前主要采用电转化法和CaCl2法将外源DNA导入受体细胞中，并需要相应地制备电转化感受态细胞和CaCl2感受态细胞。实验目的：学习感受态细胞的制备过程实验材料：大肠杆菌菌株DH5a或DH10B实验原理：电转化法是利用瞬间高压在细胞上打孔，因而需用冰冷的超纯水多次洗涤处于对数生长前期的细胞，以使细胞悬浮液中应含有尽量少的导电
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