- ￥360
- 昂羽
- 中国
- G6073-10
- 2026年02月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 运输方式：
干冰
- 规格：
10×100ul
产品线有：克隆 热激 感受态细胞、 克隆 电击 感受态细胞、 表达 热激 感受态细胞、 发根 农杆菌 化转 感受态细胞、 发根 农杆菌 电击 感受态细胞、 农杆菌 化转 感受态细胞、 农杆菌 电击 感受态细胞、 酵母 感受态细胞
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文献和实验的细菌情况有所不同),这时比较合适.密度过高或不足均会影响转化效率. 2. 质粒的质量和浓度: 用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态DNA(cccDNA).转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,转化效率就会降低.1ng的cccDNA即可使50μl 的感受态细胞达到饱和.一般情况下,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5％. 3. 试剂的质量: 所用的试剂,如CaCl2 等均需是最高纯度的(GR.或AR.),并用超纯水配制,最好分装保存
。一般情况下,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5％。 试剂的质量: 所用的试剂,如CaCl2 等均需是最高纯度的(GR.或AR.),并用超纯水配制,最好分装保存于干燥的冷暗处。 防止杂菌和杂DNA的污染：整个操作过程均应在无菌条件下进行, 所用器皿, 如离心管, tip头等最好是新的,并经高压灭菌处理,所有的试剂都要灭菌,且注意防止被其它试剂、DNA酶或杂DNA所污染, 否则均会影响转化效率或杂DNA的转入, 为以后的筛选、鉴定带来不必要的麻烦。 本实验以E.coli DH5a菌株
酶和甲基化酶的突变体（Rˉ，Mˉ），它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法（如电击法，CaCl2，RbCl（KCl）等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞（Compenent cells）。进入受体细胞的DNA分子通过复制，表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子（Transformant，即带有异源DNA分子的受体细胞）。目前常用的感受态细胞
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