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文献和实验膜蛋白的分离、鉴定及其功能分析—GFC/IEC/SDS-PAGE 和 MALDI-TOF-MS 方法
的方法可能不能直接应用在其他材料上,但这些方法可以为读者在进行其他材料的实验过程中提供优化指导。 2. 材料 ( 1 ) 分离缓冲液:5 mmol/L BTP-MES ( pH 7. 5 );0.2 mol/L 碘化钾, 1 mmol/L Na2EDTA,0.3 mol/L 甘露醇, 20% ( m/m) 甘油,5 mmol/L 二硫苏糖醇(DTT ) ,0.5% (V/V) 蛋白酶抑制剂混合物(Sigma 公司)和 15 mmol/L n-辛基-β-D-吡喃
化合物可以看成是吡喃的衍生物,叫吡喃糖。因此,葡萄糖的全名应为α-D(+)-或β-D(+)-吡喃葡萄糖。 α-和β-糖互为端基异构体,也叫异头物。D-葡萄糖在水介质中达到平衡时,β-异构体占63.6%,α-异构体占36.4%,以链式结构存在者极少。 为了更好地表示糖的环式结构,哈瓦斯(Haworth,1926)设计了单糖的透视结构式。规定:碳原子按顺时针方向编号,氧位于环的后方;环平面与纸面垂直,粗线部分在前,细线在后;将费歇尔式中左右取向的原子或集团改为上下取向,原来在左边的写在上方,右边
electrophoresis): 利用特殊的一种缓冲液(两性电解质)在聚丙烯酰胺凝胶内制造一个pH梯度,电泳时每种蛋白质就将迁移到它的等电点(pI)处,即梯度中的某一pH时,就不再带有净的正或负电荷了。 双向电泳(two-dimensional electrophoresis): 是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。 Edman降解(Edman degradation): 从多肽链游离
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