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- 2025年07月13日
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北京诺博莱德科技有限公司
Biogems 转录因子固定/破膜剂
简要描述：
产品名称：Biogems 转录因子固定/破膜剂
产品货号: 92550-00-50
英文名称：Transcription Factor Fixation/Permeabilization Concentrate
产品规格：50ml
产品简介：
转录因子固定/渗透溶液可以与相关抗体一起染色转录因子，如Foxp3，以及细胞因子、趋化因子和核蛋白的核内染色。浓缩液应与转录因子固定/渗透稀释和渗透缓冲液一起使用。
产品使用说明：
一）应用于流式细胞仪检测临床全血标本细胞内多项免疫学指标
肝素钠抗凝的全血样本，室温存放，在24 小时内使用。
1. 取抗凝血50ul 放入流式管中。
2. 加入检测细胞表面分子用的荧光素标记抗体，混和均匀，室温避光孵育20 分钟 。
3. 加入1ml 溶血素，振荡均匀，室温放置20 分钟，离心（300g 5 分钟）去除上清液。
4. 用1ml PBS 重悬洗涤细胞，离心（300g 5 分钟）去除上清液。
5. 加入300ul 固定/ 破膜剂，振荡均匀，室温放置20 分钟。离心（300g 5 分钟）去除上清液。
6. 加入胞内细胞因子检测用荧光素标记抗体，混和均匀，室温避光孵育20 分钟 。
7. 用1ml PBS 重悬洗涤细胞，离心（300g 5 分钟）去除上清液。
8. 上机分析。
（二）应用于流式细胞仪检测外周血PBMC 的细胞内多项免疫学指标
1. 使用淋巴细胞分离液分离外周血样本，获得新鲜PBMC（外周血单个核细胞）后，取1X106的细胞放入流式管中。
2. 加入检测细胞表面分子用的荧光素标记抗体，混和均匀，室温避光孵育20 分钟 。
3. 加入300ul 固定/ 破膜剂，振荡均匀，室温放置20 分钟。离心（300g 5 分钟）去除上清液。
4. 加入检测细胞内细胞因子用的荧光素标记抗体，混和均匀，室温避光孵育20 分钟 。
5. 用1ml PBS 重悬洗涤细胞，离心（300g 5 分钟）去除上清液。
6. 上机分析。
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文献和实验dsDNA 微阵列又叫蛋白质结合微阵列(Protein binding microarray, PBM), 由Bulyk等[7]在1999 年首次提出。它的基本原理是在玻片上很小的面积内(约1 cm2)固定成千上万的dsDNA分子作为探针, 检测与大量DNA分子与DNA结合蛋白之间的相互作用。这种检测在原理上模拟的是DNA结合转录因子在体内与其DNA结合位点的相互作用。在基因组DNA中, 转录因子的DNA结合位点一般是一段很短(约5~20 bp)的序列, 如转录因子HIF-1的结合
。染色体中的组蛋白去乙酰化可使染色体的结构更加致密，从而抑制基因的转录。组蛋白去乙酰化酶抑制剂使染色体由致密状态变为活化状态，从而使一些抑制肿瘤生长的基因激活。因此，这些抑制剂有望开发为肿瘤治疗的药物。组蛋白去乙酰化酶(HDAC)在哺乳动物中可分为3类。 (1)第一类：为酵母转录调控子 RPD3 蛋白的同类物，这是第一个被鉴定出来的 HDAC。它包括 HDACl～3，可与转录因子E2F 结合，通过与 Rb 蛋白相关途径抑制转录。 (2)第二类：为酵母 HDAl 类蛋白质，包括 HDAC4～
全基因组范围内组蛋白 DNA 及染色质修饰等 DNA 区段信息。 图 2：ChIP-seq 流程 ✦ ChIP-seq 原理： 将通过 ChIP 特异性收集到的与目的蛋白结合的 DNA 片段进行纯化与文库构建，ChIP-seq 继承了 ChIP 的技术难点，需要先用甲醛将与 DNA 互作的蛋白固定，这个过程会造成一些非相关蛋白交联，形成假阳性。一些作用力小的转录因子或者由于甲醛交联不充分，在超声破碎时会造成假阴性。为了消除背景噪音，则需加大细胞投入量。ChIP 以及 ChIP-seq 无法
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