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北京诺博莱德科技有限公司
源井生物 单克隆鉴定试剂盒(免抽提)
简要描述:产品名称:源井生物 单克隆鉴定试剂盒(免抽提)现货
产品货号:YK-MV-100
本产品可用于细胞基因型的快速鉴定,克服了传统核酸提取法的细胞用量大、技术步骤繁杂、时间成本高、产物纯度低等多种缺点,仅需三步免抽提,对少量细胞进行核酸裂解即可用于PCR检测,操作简便并能大大提高PCR成功率。
产品介绍:
本试剂盒是专门针对基因编辑细胞株构建过程中的单克隆鉴定环节所开发的产品,能在单克隆生长早期即开始鉴定,提前筛选到合格的单克隆,不仅可缩短2-4周的实验周期,还减少了培养非阳性克隆的培养成本与人力。单克隆细胞基因组样品的制备只需15-20分钟,直接裂解细胞释放基因组,不需纯化即可直接进行下游的PCR实验,操作简便,还能进行96孔板高通量鉴定操作,同时鉴定上百个细胞样品。
优选的PCR试剂CloneAmp Taq Mix(+Dye)可以兼容粗提的基因组样品中残余的培养基和细胞裂解后的成分等可能会影响PCR反应的因素,配合上述核酸裂解液,能快速鉴定出单克隆细胞的基因型。
本试剂盒经过大量的内部测试,贴壁细胞与悬浮细胞均可用,人源细胞、小鼠细胞、大鼠细胞或是其他动物源性细胞均可适用。建议样品量为3x103~105个细胞(一般96孔细胞培养板为1x104/孔),样品量不少于30-50个细胞。
产品优势
(1)使用简便:仅需3步即可完成基因组样品的制备;裂解产物无需纯化便可直接用于下游PCR实验;利用96孔板同时鉴定上百个单克隆,可轻松实现单克隆的高通量鉴定。
(2)微量细胞:细胞样品用量低至30-50 cells,在单克隆早期生长阶段即可对其基因型进行鉴定,大大缩短实验周期,减少实验成本。
(3)产物耐存:裂解产物所含DNA模板量可用于20~30次PCR实验,并且能在低温环境中保存数月,可满足多次重复鉴定的需求。
(4)精选试剂:试剂盒内含优选PCR鉴定试剂,可兼容粗提的基因组样品中残余的培养基和细胞裂解后的成分等可能会影响PCR反应的因素,确保能快速地获得准确的鉴定结果。
(5)应用广泛:可适用于各类贴壁细胞与悬浮细胞,包括但不限于人源细胞、小鼠细胞、大鼠细胞或其他动物源性的细胞,并且支持各类基因编辑实验的单克隆细胞鉴定。
试剂盒组成
|
组分 |
YK-MV-100 |
YK-MV-250 |
YK-MV-1000 |
保存温度 |
|
|
MicroCell DNA Lysis |
Buffer A |
10 mL |
25 mL |
100 mL |
常温 |
|
Buffer B |
1 mL |
2.5 mL |
10 mL |
常温 |
|
|
PCR Validation |
CloneAmp Taq Mix(+Dye) |
1.25 mL |
3.75 mL |
12.5 mL |
-20℃ |
|
CloneAmp Ctrl |
200 μL |
500 μL |
2 mL |
-20℃ |
|
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发现,提取酵母DNA当模板时,不能按操作手册说明的模板的用量进行PCR,而应该降低模板的用量,一般在ng水平已足够。譬如,挑取单菌落于3mL适宜培养液中,摇菌过夜,用试剂盒提取酵母DNA,取1uL提取产物作为模板进行PCR鉴定已足够。 参考步骤 (1)直接用枪尖或者牙签取单克隆到10ul无菌去离子水中; (2)加5ul5u /ul的溶细胞酶(SIGMA); (3)37度孵育30分钟; (4)-70度15分钟; (5)煮沸5分钟; (6)12000转离心5分钟; (7)取上清5ul
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