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- 技术资料
- 库存:
99999
- 英文名:
RNA-direct qPCR Master Mix
- CAS号:
ISO9001
- 保质期:
有效期见于产品标签
- 供应商:
环凯微生物
- 保存条件:
贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖
- 规格:
100次/盒(20μl体系)
产品名称:RNA-direct qPCR Master Mix
中文名称:RNA-direct qPCR预混液
产品编号与包装规格:
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
| HKE198-01A | RNA-direct qPCR Master Mix | 100次(20μl体系) | RNA直接进行qPCR的预混液 | 918 |

产品描述:本制品是采用探针法进行一步法 qRT-PCR 的定性、定量反 应专用试剂。在同一体系中,完成从反转录到 qPCR 的全部反应 本制品采用配体修饰的 Tth 酶,通过高温反转录过程,有效消除 了 RNA 高级结构和低温条件下引物非特异性退火对 cDNA 合成 的不利影响,从而增加了反转录的特异性,提高了扩增的效率和 产量。并结合特别配方的反应缓冲液,可以在较宽的定量区域内 得到良好的标准曲线,准确定量。
产品特点:
同时具有反转录酶活性与聚合酶活性,能够用于一步法检 测。
具有更高的反转录温度 60℃~70℃,反转录的特异性高。
对 PCR 抑制物具有更高的耐受性。
使用建议:使用时请上下颠倒轻轻混合,避免起泡,并经轻微离心后 使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、 Microtube 等,尽量避免污染。
保存温度:-20℃储存。
RNA-direct qPCR Master Mix 产品包装:

RNA-direct qPCR Master Mix 常用反应体系(20μl):


RNA-direct qPCR Master Mix 推荐 PCR 反映程序*:

注意事项:
1)Tth 的反转录温度在 60℃~70℃;反转录时间可以 为 15~30min。
2)该体系更适合于特异性引物进行 RT 反应,并且引 物 Tm 值应为 60℃或更高温度。
3)反应体系中含有 Mn2+,因此,本体系保真度有所 降低,不适合于保真度要求较高的克隆、测序等实验。



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文献和实验
几个复孔,选择重复性好的 CT 值参与计算。 (2)CT<30,重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法:从以下几个方面进行问题的排查:①加样准确度;②移液器吸取液体的准确度;③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样,减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系,并且增加模板的稀释梯度,大体积加样。如:原液 cDNA 添加 1μl,可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍,添加 5μl,使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
充分的准备是实验成功的关键,那么,qPCR 实验需要提前做好哪些了解呢? 试剂的储存条件 市面上大多数 qPCR 试剂推荐 - 20 ℃ 避光长期储存。 Vazyme 的 ChamQTM 和 AceQ® 两个系列的 qPCR Master Mix,长期储存应置于 - 20 ℃ 避光,解冻后可于 4 ℃ 短暂存放;避免反复冻融。 原始模版稀释倍数 尽量选择 Ct 值落在 15 - 28 范围的稀释倍数作为原始模板稀释度。 反应体系与次数 推荐 20 μl 体系,Vazyme
大家一臂之力,里面包含单独成管的 Oligo (dT)20VN 及 Random hexamers,可以根据模板类型和后续实验需求灵活选择或按比例混和;还有 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)(R323),包含逆转录反应所需的所有组分,当然 Random primers 和 Oligo (dT)20VN 的混合引物也直接在这管 SuperMix 中,只需加入模板 RNA,20 min 内即可完成逆转录反应,极为方便! 第三个选择就是基因
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