干冰运输；效期短；花生四烯酰溶血磷脂酰肌醇(铵盐)

饱和硫酸铵盐析沉淀法纯化多克隆抗体

材料和试剂 1. 饱和硫酸铵(saturated ammonium sulfate，SAS)。 2. 透析袋。 3. PBS。 4. 高速低温离心机。 操作步骤 1. 待提取样品经4℃或室温离心13 000r/min(20000×g)，30min，收集上清； 2. 取上清约20ml与等体积生理盐水混合后，于搅拌下缓慢滴加40ml SAS，于4℃沉淀30min以上或过夜，使蛋白充分沉淀。 3. 13 000r/min，10min 4℃离心，弃上清。

脂类代谢复习笔记

化成丙二酰CoA后才参与合成，最终可合成含16碳的软脂酸。在肝线粒体和内质网分别以乙酰CoA和丙二酰CoA为原料延长碳链，生成更长碳链的脂肪酸。以软脂酸为前体在体内可生成多不饱和脂肪酸，但必需脂肪酸（亚麻酸，亚油酸及花生四烯酸）在体内合成不足和不能合成，必须靠食物供给。1、脂肪酸的氧化首先经过活化，在ATP、CoASH、Mg2＋存在时候，由酯酰CoA合成酶（内质网、线粒体外膜上的）催化生产酯酰CoA。 酯酰CoA的转移于胞液中进行，而催化脂肪酸氧化的酶系又是在线粒体基质内，所以肯定要进行一次转移

膜片钳的多种记录形式

inside-out mode）。这种方法的细胞体积越大，破坏部位离被吸附膜片越远或破坏孔越小，均可导致细胞质因子外流变慢。 3. 膜外面向外模式（outside-out mode）　如果从上述的全细胞模式将膜片微电极向上提起可得到切割分离的膜片，由于它的细胞膜外侧面面对膜片微电极腔内液，膜外面自然封闭而对外，所以这个模式被称为膜外面向外模式（outside-out mode）。此构型多用于研究细胞膜外侧受体控制的离子通道，研究腺苷酸环化酶、多磷酸磷脂酰肌醇激酶、蛋白激酶C等活动性变化，以及细胞膜上信使物质