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- 上海科梦达生物
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- K2944
- 2025年09月18日
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上海科梦达生物
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20次
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上海科梦达生物主营：动物血清血浆全血，各种浓度红细胞，ELISA试剂盒，生化试剂盒，PCR试剂盒，胎牛血清（Gibco/BI/Gemini/PAN等），细胞（细胞系，原代细胞），培养基，各类抗原，抗体，抗血清，感受态细胞，考马斯亮蓝蛋白快速染液等，液相检测， 气相检测 ，液质联用检测 ，常规生理生化测定，土壤检测，elisa检测服务（购买本公司ELISA试剂盒免费代测）
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文献和实验一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
问：刚买了南京建成的LDH试剂盒，打算用酶标仪检测细胞的LDH释放率，但是有几个问题比较困惑？1、用96孔板种细胞，密度应该种多大？2、细胞培养液应该加多少？用1640会影响OD值的测定吗？是否应加上单独培养液作为对照呢？3、测上清液的LDH时，应该取多少作为样本呢？4、超声破碎细胞时，需要破碎多长时间？5、因用96孔板检测，可否将说明书中的液体用量减到1/10？这样会对结果有影响吗？答：什么细胞？如果细胞分裂速度较慢，我建议1x105-2x105。较快可以降到5x104，培养基100微升
1. 原理：LDH (乳酸脱氢酶） 是稳定的胞浆酶，存在所有的细胞中，当胞膜损伤时快速释放到细胞培养液中。 LDH 活性通过两个酶催化反应： LDH 氧化乳酸盐生成丙酮酸盐，然后丙酮酸盐和四唑盐 INT 反应生成甲（ formazan ）结晶。甲（ formazan ）结晶量在培养液中的增加，与裂解的细胞数增加直接相关。甲（ formazan ）结晶染料是水溶的，可以用分光光度计在 500nm 波长检测。通过检测细胞培养上清中
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