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- 上海科梦达生物
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- K2849
- 2025年09月18日
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上海科梦达生物
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上海科梦达生物主营：动物血清血浆全血，各种浓度红细胞，ELISA试剂盒，生化试剂盒，PCR试剂盒，胎牛血清（Gibco/BI/Gemini/PAN等），细胞（细胞系，原代细胞），培养基，各类抗原，抗体，抗血清，感受态细胞，考马斯亮蓝蛋白快速染液等，液相检测， 气相检测 ，液质联用检测 ，常规生理生化测定，土壤检测，elisa检测服务（购买本公司ELISA试剂盒免费代测）
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文献和实验染色液，10~30 min后在荧光显微镜下或者激光共聚焦下观察。线粒体状态好时细胞以绿色为主，当红光信号增强时，红绿相叠，以橙色为主。该染色运用于悬浮细胞时还可以通过流式细胞仪进行检测，收集红/绿信号强度，计算其强度比。 钙黄绿素-AM（Calcein-AM）：Calcein-AM本身并不是荧光分子，但通过活细胞内的酯酶作用，Calcein-AM能脱去AM基，产生的Calcein能发出强绿色荧光（激发：490 nm，发射：515 nm）。因此Calcein-AM仅对活细胞染
色，或核呈分叶状，边集的Hoechst着色的为调亡细胞。我最近在作的试验就是用的这种方法，附上一张我染的PC12细胞的图片，请大家指教。更精确的定量可以通过流式细胞仪来检测。用PI和Hoechst33342双标鉴别调亡、坏死，这种方法简便易行，结果比较可靠。 2、PI和Calcein-Am双标： Calcein-AM 是一种绿色荧光标记物，可显示胞浆，为膜通透性的荧光染料。Calcein-AM 一旦进入胞内，便可被内源性酯酶水解成绿色荧光物质calcein, 并保留在胞浆中。细胞
(Stratagene)将其UV交粘到滤膜上。滤膜用gfp基因特异的32P探针 或者AAV特异的探针杂交。如前所述进行杂交和洗涤。用随机标记试剂盒制备杂交探针。膜暴露于X线胶片。 为了估计rcAAV的量，1´106 293细胞感染了Ad（m.o.i）和CsCl2纯化的野生型AAV或vAVgal的稀释液。用pAAV/Ad或pSH3/5作为辅助质粒转染制备的vAVgfp原液被用来转导Ad感染的细胞。48小时后，培养物被收获，病毒DNA被制备并通过琼脂糖凝胶电泳和Southern 杂交分析
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