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上海科梦达生物
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仅限科学研究,不做诊断依据。
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上海科梦达生物
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真菌/酵母黑色素含量比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
真菌/酵母黑色素含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过碱性水解后释放出可溶性黑色素分子,直接由分光光度仪比色分析,定量检测细胞样品黑色素含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种真菌/酵母细胞裂解悬液的黑色素含量检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测准确。
技术背景
黑色素(melanin)是一种酪氨酸衍生物复合物,广泛存在于原核生物、动物和植物中。作为一组棕黑色的沉积色素,黑色素不含铁但含硫,不溶于水和有机溶剂,能在强碱中长时间后被溶解,被强氧化剂脱色。黑色素分成两种:优黑素(eumelanin)和褐黑素(pheomelanin)。前者为棕黑色二羟基吲哚(dihydroxyindole)、二羟吲哚羧酸(dihydroxyindole carboxylic acid)及其还原产物的多聚体;后者为棕红色的苯并噻嗪类(benzothiazine)分子。黑色素与蛋白质结合,形成复合物,通常存在于皮肤、眼睛和大脑黑质(substantia nigra)中。黑色素细胞(melanocytes)产生黑色素,存储在细胞浆的黑色素颗粒中。通过多巴氧化酶(DOPA Oxidase)的作用,使黑色素转化成黑色的多巴黑色素(dopa melanin)。黑色素的显著增加,与黑色素瘤(melanoma1)有关。在真菌/酵母细胞系统中,1,8-二羟基萘(1,8-dihydroxynapthalene;DNH)和多巴(3,4-dihydroxyphenylalanine;DOPA)黑色素为主要的黑色素成分,前者通过聚酮(polyketide)通路由乙酰辅酶A生物合成,后者通过多酚氧化酶合成。其黑色素与细胞壁相关,具有病原菌的毒力、与宿主细胞反应、抗氧化作用、防UV损伤、阻止水解酶作用、抑制抗菌剂、以及铁结合等功能。基于含有黑色素的样品在碱性水解后释放出可溶性黑色素分子,直接通过分光光度仪(490nm波长)检测,产生吸光峰值的变化,来测定黑色素的总含量。
产品内容
裂解液(Reagent A) 10 毫升
强化液(Reagent B) 2克
处理液(Reagent C) 10毫升
溶解液(Reagent D) 10 毫升
缓冲液(Reagent E) 15毫升
标准液(Reagent F) 1毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存标准液(Reagent F)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,溶解液(Reagent D)、缓冲液(Reagent E)和标准液(Reagent F)具有腐蚀性,严格注意操作安全;有效保证6月
上海科梦达生物主营:动物血清血浆全血,各种浓度红细胞,ELISA试剂盒,生化试剂盒,PCR试剂盒,胎牛血清(Gibco/BI/Gemini/PAN等),细胞(细胞系,原代细胞),培养基,各类抗原,抗体,抗血清,感受态细胞,考马斯亮蓝蛋白快速染液等,液相检测, 气相检测 ,液质联用检测 ,常规生理生化测定,土壤检测,elisa检测服务(购买本公司ELISA试剂盒免费代测)
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文献和实验C下烘干,或采用红外线烘干,也可在800C或400C下真空干燥,干燥后称重。如用过滤法,丝状真菌可用滤纸过滤,细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤,过滤后用少量水洗涤,在400C下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐,通常获取的微生物产品为菌体时,常采用这种方法,如活性干酵母(activity dry yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。3、 比浊法:微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值,判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时
干酵母(activity dry yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。3、比浊法: 微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值,判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时,可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中,即可随时测定其生长情况,而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计,在波长600nm 处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD
物经离心后,以清水洗净放人干燥器加热烘干,使之失去水分然后称重。此法适于菌体浓度较高的样品,是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。6、测定细胞总氮量或总碳量氮、碳是细胞的主要成分,含量较稳定,测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于细胞浓度较高的样品。7、颜色改变单位法(colour change unit,简称CCU)这种方法通常用于很小,用一般的比浊法无法计数的微生物,比如支原体等,因为支原体的液体培养物是完全透明的,呈现为清亮透明红色,因此无法用比浊法来计数,由于支原体固体培养很困难,用cfu
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