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参考说明书
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2-8℃/-20℃
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上海科梦达生物
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20次
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上海科梦达生物主营:动物血清血浆全血,各种浓度红细胞,ELISA试剂盒,生化试剂盒,PCR试剂盒,胎牛血清(Gibco/BI/Gemini/PAN等),细胞(细胞系,原代细胞),培养基,各类抗原,抗体,抗血清,感受态细胞,考马斯亮蓝蛋白快速染液等,液相检测, 气相检测 ,液质联用检测 ,常规生理生化测定,土壤检测,elisa检测服务(购买本公司ELISA试剂盒免费代测)
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文献和实验1 原理 中性粒细胞中的碱性磷酸酶(简称碱酶)在一定条件下能使β-甘油磷酸钠水解释出无机磷, 后者与钼酸试剂结合成磷钼酸复合物, 再以氨基萘酚磺酸还原为钼蓝而呈现蓝色,用光电比色法求得所释放的无机磷含量,表示酶的活性。 2 试剂 a.葡聚糖:分子量20万,用生理盐水配制成2%溶液,在冰箱中可保存一个月。 b.β-甘油磷酸钠溶液(0.026M):称取β-甘油磷酸钠溶于碳酸—重碳酸盐缓冲溶液,将pH调至9.9,液面盖一层石油醚,在冰箱内保存
计算出底物消耗速度或产物生成速度,将速度换算为μmol/min即是以国际单位表示的酶活性。 例如: 假设某一样品种的酶活性记为X U/L,取样品量VS(mL)与底物缓冲液Vr(mL)孵育,t min后加入终止液Ve(mL),检测到的净吸光度增加为A,该产物的摩尔消光系数为ε(一般可通过带标准求得),比色皿光径为 b cm。③ 连续监测法计算 酶与底物在特定条件下孵育,每隔一定时间(2-60 s)连续测定酶促反应过程中某一底物或产物的特征信号的变化,从而计算出每分钟的信号变化速率。连续监测法
。摇匀后在30℃保温箱或恒温水浴中保温30min,然后在540nm波长下比色。以亚硝态氮(μg)为横坐标,光密度值为纵坐标绘标准曲线或建立回归方程。表13-1 各试剂加入顺序 2. 酶反应和酶活性测定 (1)取样 将材料(小麦、玉米等作物叶片)洗净,用蒸馏水冲洗,滤纸吸干。在叶片中部打取直径1cm的圆片(或剪成0.5~1.0cm2的小块),混匀后每个样品称0.5~1.0g 3份,放入试管并编号。 (2)反应 向各试管加入KNO3·异丙醇·磷酸缓冲液混合液9ml,其中一管立即加
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