腺苷脱氨酶（ADA）测试盒（酶比色法）

腺苷脱氨酶（ADA）测试盒（酶比色法）广泛分布于各组织中。盲肠、小肠粘膜和脾中含量最高，肝中含量仅为小肠的7%-14%，肝脏中90%在细胞质中，细胞核含量低，但却是胞核中有关核酸代谢酶中含量最高的一个。在肝脏疾病中，ADA活性增高。阻塞性黄疸时此酶活性一般不升高，而在肝实质损伤时，此酶和ALT同时升高，帮有助于鉴别。在慢性活动性肝炎和肝硬化时ALT阳性率较低，而ADA阳性率可达90%左右，增高较明显。
　　腺苷脱氨酶ADA催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤核苷和氨，然后对产生的氨进行显色，从而可以计算血清ADA的活性。
产品优点如下：
1、快速简便：全程约2小时，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取样本量仅为20l
3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放3个月有效。
4、再现性好：变异系数CV=1.7%。
5、回收试验： X =102%。
6、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
7、测试面广：可测动物组织、血清等，效果均佳。
腺苷脱氨酶（ADA）测试盒（酶比色法）产品图片;
 


所需仪器及自备试剂：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、漩涡混匀器
4、台式离心机
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程：
1、按步骤加入样本和R1、R2混合试剂，37℃水浴60分钟
2、加入R3、R4，抽提室温静置40分钟，3500～4000转/分，离心10分钟
3、取上清0.5 ml，加入显色剂，静置10分钟，550nm波长，0.5cm光径，比色
腺苷脱氨酶（ADA）测试盒（酶比色法）技术参数
  

批间CV	批内CV	回收率	最底检出线	检测范围
3.99	2.4	103	0.01mmol/L	0.01-6mmol/L

本试剂盒保存期：3个月，贮存温度：2～8℃，特别提醒R1、R2以及标准品需放在-20℃以下冷冻保存。
发表文章
1. Kok Poh Loh, Jia Qi, Benny Kwong Huat Tan, et al. Leonurine Protects Middle Cerebral Artery Occluded Rats Through Antioxidant Effect and Regulation of Mitochondrial Function. Stroke, 2010, 41:2661-2668.
2. Muxin Wei, Yanmin Wu, Dezheng Chen, et al. Changes of free radicals and digestive enzymes in saliva in cases with deficiency in spleen-yin syndrome. Journal of Biomedical Research, 2010, 24(3):250-255.
3. Zhang Yong, Tang Hao-Ru, Luo Ya, et al. Variation in Antioxidant Enzyme Activities of Two Strawberry Cultivars with Short-term Low Temperature Stress. World Journal of Agricultural Sciences, 2008, 4 (4): 458-462.
4. Shao-Hua Liu, Ke Ma, Xin-Rong Xu, et al. A single dose of carbon monoxide intraperitoneal administration protects rat intestine from injury induced by lipopolysaccharide. Cell Stress and Chaperones, 2010,15:717-727.
5. Lei Liu, Yan Liu, Jie Cui, et al. Oxidative stress induces gastric submucosal arteriolar dysfunction in the elderly. World J Gastroenterol, 2013,19(48): 9439-9446. 
6. Qifeng Zhao, Lan Shao, Xingti Hu, et al. Lipoxin A4 Preconditioning and Postconditioning Protect Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury in Rats. Mediators of Inflammation, Volume 2013, Article ID 23135, http://dx.doi.org/10.1155/2013/231351.
7. Gen-Xiang Mao, Ling-Di Zheng, Yong-Bao Cao, et al. Antiaging Effect of Pine Pollen in Human Diploid Fibroblasts and in a Mouse Model Induced by D-Galactose. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, Volume 2012, Article ID 750963. doi:10.1155/2012/ 750963.
8. Jia-Qing Zhang, Ming Shen, Cheng-Cheng Zhu, et al. 3-Nitropropionic Acid Induces Ovarian Oxidative Stress and Impairs Follicle in Mouse. PLoS ONE, 2014, 9(2): e86589. doi:10.1371/ journal.pone.0086589.
9. Hong-Xia Li, Yu Xiao, Ling-Ling Cao, et al. Cerebroside C Increases Tolerance to Chilling Injury and Alters Lipid Composition in Wheat Roots. PLoS ONE, 2013, 8(9): e73380. doi:10.1371/journal.pone.0073380.
10. Yan Deng, Wei Wang, Pingfeng Yu, et al. Comparison of taurine, GABA, Glu, and Asp as scavengers of malondialdehyde in vitro and in vivo. Nanoscale Research Letters, 2013, 8:190.
植物组织样本的前处理
一、匀浆介质
一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
二、组织匀浆的制备
1、取组织块（0.2g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式：手工匀浆，机器匀浆。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成20%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成20%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行,可适当延长匀浆时间），
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片（直接涂片、染色均可以），显微镜下观察细胞是否破碎，若没有则可延长匀浆时间。
4、将制备好的20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.
三、样本保存:
        植物组织样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中间如不反复冻融，-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。
        制备好的匀浆液建议不要冻存,最好当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降,部分指标4℃可存放3～5天(如SOD要存放2～3天,MDA可存放3～5,总蛋白测定可存5～7天等)
腺苷脱氨酶（ADA）测试盒（酶比色法）本研究所郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到，如有质量问题，本研究所负责包退包换。