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上海科梦达生物
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上海科梦达生物主营:动物血清血浆全血,各种浓度红细胞,ELISA试剂盒,生化试剂盒,PCR试剂盒,胎牛血清(Gibco/BI/Gemini/PAN等),细胞(细胞系,原代细胞),培养基,各类抗原,抗体,抗血清,感受态细胞,考马斯亮蓝蛋白快速染液等,液相检测, 气相检测 ,液质联用检测 ,常规生理生化测定,土壤检测,elisa检测服务(购买本公司ELISA试剂盒免费代测)
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文献和实验LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
的定量。 更多有关特定CpG位点的甲基化的详细信息,可采用重亚硫酸氢盐修饰后测序分析。 LightCycler主要应用:实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析 我们使用罗氏诊断公司的LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在LightCycler®480实时荧光PCR仪上,通过MS-HRM测定法对两种已知的经过启动子(FANCE和MGMT)甲基化的DNA修复基因的检测性能。 材料和方法 将多种细胞株的DNA样本作为检测模板。每μg的每种DNA样本都经过重亚硫酸盐修饰
个外显子区[7]。健康人基因组中,CpG岛中的CpG位点通常是处于非甲基化状态,而在CpG岛外的CpG位点则通常是甲基化的。这种甲基化的形式在细胞分裂的过程中能够稳定的保留[8]。当肿瘤发生时,抑癌基因CpG岛以外的CpG序列非甲基化程度增加,而CpG岛中的CpG则呈高度甲基化状态,以致于染色体螺旋程度增加及抑癌基因表达的丢失[9]。 1.2 DNA甲基化的生物学作用 1.2.1 DNA甲基化与遗传印记、胚胎发育 DNA甲基化在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育过程中起着极其重要的作用。研究表明
使用限制性内切酶,因此不同程度地受到内切酶识别位点的限制。 研究甲基化的方法之多,从一个方面说明了甲基化研究难度之大,也从另一个方面说明这些方法都存在着一定的限制。面对具体问题,选择最合适的解决方法就显得尤为重要。首先,根据研究目的选择合适方法:是研究整体水平的甲基化还是特定位点的甲基化,或是要发现全基因组中新的甲基化位点;其次,根据客观条件筛选方法,如:目标的序列是否已知,是定量研究还是定性研究,样本来源及数量如何,是否需要高通量的样本检测方法;最后,全面分析,选取敏感、可靠、经济、简便的方法
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