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- 上海科梦达生物
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- K1039
- 2025年09月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 适应物种：
参考说明书
- 标记物：
2-8℃/-20℃
- 样本：
上海科梦达生物
- 规格：
10毫升
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上海科梦达生物主营：动物血清血浆全血，各种浓度红细胞，ELISA试剂盒，生化试剂盒，PCR试剂盒，胎牛血清（Gibco/BI/Gemini/PAN等），细胞（细胞系，原代细胞），培养基，各类抗原，抗体，抗血清，感受态细胞，考马斯亮蓝蛋白快速染液等，液相检测， 气相检测 ，液质联用检测 ，常规生理生化测定，土壤检测，elisa检测服务（购买本公司ELISA试剂盒免费代测）
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文献和实验液（8 cm × 8 cm 的膜加 5 mL 即可），将膜的背面贴紧杂交瓶壁，正面朝向杂交液。放入 42 ℃ 杂交炉中，使杂交体系升到 42 ℃。取经超声粉碎的鲑鱼精 DNA（已溶解在水或 TE 中）100 ℃ 加热变性 5 min，迅速加到杂交瓶中，使其浓度达到 100 μg/mL。继续杂交 4 hr。鲑鱼精 DNA 的作用是封闭 NC 膜上没有 DNA 转移的位点，降低杂交背景、提高杂交特异性。2．杂交倒出预杂交的杂交液，换入等量新的已升温至 42 ℃ 的杂交液，同样加入变性的鲑鱼精 DNA。将探针
0.8； 4. 室温下3000g离心收集酵母菌体，50ml缓冲液A洗涤一次； 5. 重悬菌体于4ml缓冲液A中，按0.2ml/管分装于1.5ml的离心管中，每管加入11ulDMSO，混合后迅速于液氮中冷冻， 6. -70℃保存 毕氏酵母的转化 1. 将约50ug线性化质粒DNA溶于20ul TE或水中，直接加于冻结的酵母细胞中；加入担体DNA（40ug变性超声线性化鲑鱼精DNA）以获得最大转化率； 2. 37℃水浴孵育5min，中间混合样品1～2次；
珠子对照样品外每个样品中加入一抗，抗体的量按照以往经验来加，1-10ug的抗体/25ugDNA效果较好。3加入20ul的proteinA/G珠子（预先用超声处理成为单链的鲱精DNA和BSA吸附，详见步骤4.3a）到所有样品总，4°C摇转IP过夜。3a将蛋白A/G珠子与单链鲱精DNA进行预处理。如果同时使用蛋白A珠子和蛋白G珠子，等体积混合这两种珠子使用RIPA溶液洗3次。除去RIPA溶液，加入单链鲱精DNA到珠子终浓度为75ng/μl，再用BSA将珠子终浓度定到0.1μg/μl。加入两倍珠子
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