GFP-PA5143608

Photoactivatable-GFP--Tubulin as a Tool to Study Microtubule Plus-End Turnover in Living Human Cells

The development of photactivatable (PA) variants of Green fluorescent protein (GFP) has allowed the dynamics of spatially restricted protein pools within living cells to be determined. Over the last 5 years, experiments utilizing PA-GFP fused

从蛋白质中间进行酶切反应

的生理性底物p21和a-synuclein和稳定的GFP被潜在的关闭20S蛋白酶体和活性的开放蛋白酶体26S进行降解的过程。其中20S是蛋白酶体的核心，26S是20S蛋白酶体加上PA700的调控性帽子所形成的。 他们发现p21和a-synuclein能有效的被20S和26S蛋白酶体进行降解，而GFP在两种条件下都不被降解。20S的蛋白酶体不能降解短的肽段，但它能有效的降解p21和a-synuclein的现象说明，未折叠蛋白自身就能开放某些活性的酶切位点，使得蛋白酶体能够有效

利用绿色荧光蛋白进行免疫印迹的操作步骤

4.封闭液：PBS + 5%脱脂奶粉 5.漂洗液：PBS + 0.2%Triton X-100 6.丽春红染色液：4%三氯醋酸，1%丽春红 7.一抗：兔抗GFP血清，用PBS适稀释50-100倍 8.辣根过氧化物酶标记的蛋白A (HRP-pA) 9.DAB显色液：DAB 1mg，溶于5mL的50mmol/L 的Tris-HCl(pH 7.4-7.6)中，然后加入50微升的0.5%的过氧化氢。显色液不稳定，要在临用前配制。