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- 赛默飞（Thermo Fisher）
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- 2025年07月14日
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文献和实验出来的.像前面几位战友说的那样,可以考虑加大上样量 2. 是否WB的条件不好? 可以跑其他蛋白的WB看看,如果其他蛋白质都跑出来的很好的话, 可以考虑换个抗体试一试,,但是话说回来,cell signaling的p-AKT 很好的,我也用了好几年.ser473和T308都不错的. 3. 条带弱的话,可以用 can get sinal 去提高抗体的敏感度. BTW, 我自己跑p-akt的时候, 1抗是1:1500 2抗是 1:20000 good luck
米宝 这俩天做实验，极其郁闷。我做的总AKt和pAkt,大鼠脑组织，第一次跑总AKT的时候，我觉得可能是因为蛋白是提取的浓度比较好吧，出来了一条浓浓的条带，三组总AKt都出了，接下来做pAkt,就出了一个带，效果挺明显的。后来再做pAkt的时候，跑了4张膜，显影的时候，太干净了，上面什么都没有，甚至连个杂带，斑点 都没！实验是在实验员的领导下完成的，技术上基本没什么纰漏，查阅本版面有关这问题方面的介绍，有的解释说pakt降解了！一抗是用的Phospho-Akt
receptorr 我在做HaCaT细胞的磷酸化Akt(473)时，背景比较高，该怎么办？（即未处理组的Akt比较高） 请高手支招。 谢谢 magichunter 说得太粗略了。 receptorr 我做的细胞是HaCaT 看看加入药物后HaCaT的磷酸化Akt是否有增高， 所以希望没有加药的那一组HaCaT的磷酸化Akt水平低 但是实际做时，发现没有
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