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20 UG
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文献和实验的用量每次为0.5-1毫升。洗涤时离心条件和吸除上清的要求同上面的步骤C3。 5).完成最后一次洗涤后,去除上清,加入20-40微升1XSDS-PAGE电泳上样缓冲液Vortex重悬沉淀,瞬时高速离心把样品离心至管底。 6).100℃或沸水浴处理3-5分钟,取部分或全部样品可测定浓度或者用于SDS-PAGE电泳,暂时不用的样品可以-20℃保存。Western blot检测实验试剂:Phosphotyrosine抗体( Millipore, #05-321, 1:500);Goat Anti
Determining In Vivo Phosphorylation Sites Using Mass Spectrometry
base (pH not adjusted) Phosphotyrosine P‐Tyr‐100 mouse antibody (mAb), Sepharose conjugated (Cell Signaling Technology, cat. no. 9419)
Imaging Protein‐Protein Interactions by Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) Microscopy
Antibody (e.g., PY72 monoclonal anti‐phosphotyrosine antibody) labeled with Cy3 (see protocol 3 ) 1% (w/v) bovine serum albumin (BSA, fraction V) in recipePBS
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