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- 赛默飞（Thermo Fisher）
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- 2025年07月16日
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文献和实验Purification of Gcn4 James Fishburn,Hahn Lab March 2006 Gcn4 constructs are cloned into the pET21(a)vector and have a 6-His tag expressed at the N-terminus Gcn4 is expressed and purified from BL21(DE3)RIL cells Day 1 Grow 10+ ml culture
PEAS Labeling Gcn4-cys James Fishburn, Hahn Lab March 2006 Notes 10 mCi 125I = 4.6 nmol (see spec. sheet for calculation) 4.6 nmol Gcn4(1-118,209-281) = 103 microgram (M.W. 22,400) PEAS has low solubility in aqueous
称为高通量测序-荧光配体相互作用图谱分析（HiTS-FLIP）。 研究小组将HiTS-FLIP技术应用到酵母转录激活因子Gcn4上。首先，研究人员制备了一个随机25聚体的DNA文库，将其放入仪器，并开展测序步骤。之后他们通过变性，剥离了非天然链，利用新的引物和Klenow合成了新的DNA。他们再加入与单体(m)Orange结合的GCN4，并对结合的蛋白成像。 最后，他们在簇测序图像上叠加了蛋白结合荧光图像。簇大小的强度校正让他们能够预测特定序列的内在亲和力。之后
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