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200 UG
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文献和实验一、样本准备 详见流式细胞术样本制备技术、流式实验样本制备方法及注意事项 收集细胞,200 目筛网过滤,收集滤液,300 g 离心 5 min,弃上清 向细胞中加入适量细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS),用移液枪轻轻吹打细胞重悬 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后,调整细胞浓度约为 1 × 107/mL 三、设置实验分组 四、封闭 Fc 受体 封闭 Fc 受体能减少染色过程中的非特异性染色。 小鼠中,纯化的 CD16/CD32 单抗能和 Fc
一、样本准备 收集细胞,200 目筛网过滤,收集滤液,300g 离心 5 min,弃上清。 向细胞中加入适量细胞染色 buffer(或含1%BSA的PBS),用移液枪轻轻吹打细胞重悬。 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后,调整细胞浓度约为 1 × 107/mL。 三、设置实验分组 根据实验设计,设置实验分组,每管加入 100μL 细胞悬液。 四、封闭 Fc 受体 封闭 Fc 受体能减少染色过程中的非特异性染色。 小鼠中,纯化的 CD16/CD32 单抗
#01 什么是同型对照? 同型对照(Isotype Control),是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度,但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照? 流式抗体与靶标的结合,是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞(除T细胞外)表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体,这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合,出现非特异
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