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文献和实验signaling公司的Phospho-PI3K p85 (Tyr458)/p55(Tyr199) 我自己分析没有条带无非是细胞状态不好,或者抗体不好,不知道还有没有可能是没有加磷酸化酶抑制剂,以至于磷酸化的蛋白被去磷酸化了? 谢谢啦~ yhwangcams 检测内参蛋白如GAPDH,ACTIN,TUBULIN是否成功? 用PLB裂解细胞得到的蛋白适合做REPORTER,做WESTERN不太合适。建议可以用其他BUFFER裂解蛋白。
Nat Commun:结直肠癌致癌突变 RNF43_pG659fs 对 PI3K/mTOR 抑制剂敏感
标记进行定量蛋白质组学鉴定,结果发现 RNF43_p.G659fs 与 PI3K 调控亚基 p85 结合后将其泛素化降解,从而上调 AKT 的活性,提示 PI3K/mTOR 信号通路可做为 RNF43_p.G659fs 突变的治疗新靶点。 RNF43_p.G659fs 突变在微卫星不稳定 MSI 的患者中集中发生,但目前仍不清楚该突变和肿瘤免疫的关联。作者发现 RNF43_p.G659fs 与干扰素信号通路负相关,而且 PI3K/mTOR 抑制剂能逆转 p.G659fs 对干扰素信号通路的抑制
PI3K ― Akt 信号通路PI3K是一个复杂的大家族,根据其结构可分为3类:I型、Ⅱ型、Ⅲ型。 I型PI3K又分为IA和IB两个亚型,他们分别从酪氨酸激酶连接受体和G蛋白连接受体传递信号,其作用是催化磷脂酰肌醇(P1)在D3位的磷酸化,把底物PIP2转化为PIP3。IA型P13K是由催化亚单位Pll0和调节亚单位P85所组成的二聚体蛋白,具有类脂激酶和蛋白激酶的双重活性。在正常细胞中,P13K的活性是受许多机制严格控制的。一般认为,在静息细胞中,无活性的P85―P1lo复合物普遍
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