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文献和实验Mol Cell:杨薇等揭示 DNA-PK 的激活机制以及自磷酸化对 NHEJ 通路的重要作用
报道了 3.24 Å 的 apo-DNA-PKcs、3.9 Å DNA-PK 单体和 7.24 Å DNA-PK 二体等的冷冻电镜结构,DNA-PK 二聚化由 Ku80 的最靠近 C 端的 ⍺ 螺旋所介导,揭示了 NHEJ 通路初期 DNA 末端远端匹配的可能机制 [4]。 尽管如此,以上所有报道的结构都为抑制态,激酶结构域的激酶活性中心都处于封闭状态,无法解释 DNA-PKcs 是怎么结合 Ku70/80 和 DNA 末端以及怎么被它们激活的,且由于冷冻电镜 map 的局部分辨率不够高,无法
: 1. Prepare Whole Cell Extract. Make sure every solution DOES NOT contain DTT. 2. Add 1 or 2 μl of non-diluted monoclonal antibody (4B4 is better than 10H8 for HSF1) or 1/10 diluted polyclonal antibody to 10 μg of whole cell extract
Proteomic Strategies: SILAC and 2D-DIGEPowerful Tool to Investigate Cellular Alterations
). After exposure to high-dose radiation, an immediate down-regulation is seen in the Ku70/Ku80 heterodimer and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) proteins belonging to the NHEJ DNA repair pathway. Later time points show significant decrease in the expression
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