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文献和实验亦称缩合酶。是三羧酸循环中的一种酶, EC4. 1. 3. 7。是催化来自糖酵解或其它异化反应的乙酰 CoA与草酰乙酸缩合合成柠檬酸反应的酶。因为由乙酰 CoA游离出 CoA是放能反应(Δ G0 ′ =-7.7千卡),以致平衡趋于生成柠檬酸的方向。此酶是变构酶,一般可为 ATP所抑制,在肝脏和其它组织中成为三羧酸循环的限速步骤,存在于线粒体基质( mit-ochondrial matrix)中。
General Preparation 1. Prepare buffers and have them cold. Make 50X stock of Buffer G and dilute as needed from frozen aliquots of 50X Buffer G. 1X Extraction Buffer without detergents: 1 M Tris-Cl, pH 7.0, 0.6 M KCl, 0.5 mM ATP
In Vitro Transcription Assay (Run-off Assay) using Permeabil
10 mM ATP Store 100 μl aliquots at -70℃ Prepare in 10 mM Tris-Cl, pH 7.5 Filter sterilize Phosphocreatine Prepare fresh
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