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文献和实验先介绍一下His Tag,为5-15 His 串在一起的小肽, 在表达纯化中用的较为普遍的一种Tag, 从本质上说它是一种亲和性Tag,但也个案证明其也能做一些兼职工作:增加蛋白可溶性,提高蛋白稳定性。但它的本质工作是与IMAC亲和,使纯化过程变的更加程序化,更具可控性。 相对与其他亲和Tag,如 GST, Flag, Strep, 它的特点可谓鲜明: 一,小,浓缩的都是精华,6个His 放在一起约2.5KD大小。His 的等电点为7.6,在常用的纯化缓冲体系(pH 8.0)中
Small Scale GST-Tag Purification Under Nature Conditions
Small Scale GST-Tag Purification Under Nature Conditions According to AMERSHAM-BIOSCIENCES-GST fusion protein Handbook (pdf) Aliquot of Cell Pellet after Induction The idea is to aliquot cells after induction
鉴于原核表达的两大热门系统,his tag系统和gst系统,从园子里归纳出以下帖子,以方便大家参考。 这是关于his tag的讨论贴 蛋白纯化高手请指点(his) http://www.dxy.cn/bbs/thread/276543 请问哪位做过6-His蛋白? http://www.dxy.cn/bbs/thread/36760 his融合表达问题!再问载体! http://www.dxy.cn/bbs/thread/633019 his-tag标签纯化
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