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文献和实验—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞,PMSF(Amresco,cat:329-98-6),cocktail(上海晶莱生物),脱脂奶粉(cat:66196131T),β-actin(上海晶莱生物)。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime),细胞刮,4 度离心机(eppendorf,centrifuge
该蛋白,比如P2X7;激活的P2X7会影响离子通道的转运从而影响下游信号通路,会对L-selectin(CD62L)和CD27进行剪切,导致细胞膜内的膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧外翻,从而进入细胞早期凋亡阶段,这是经典的“NAD+诱导细胞凋亡”途径,或称为NICD,细胞因损伤而凋亡,最终获得细胞数量减少。由于获取细胞的实验过程中,需要对样本进行处理,不可避免的会对细胞造成一定的刺激,产生一定的细胞损伤。 Treg细胞的免疫抑制功能的研究一直是研究热点,但由于凋亡机制如“NAD+诱导
好芝生物(www.helixgen.com.cn)推出的 HelixGen TM MHC 四聚体产品,能快速、简便地实现对抗原特异性 T 细胞(Antigen-specific T cells)的定性与定量分析。(一)所需主要试剂和设备1)欲检测的细胞或全血;2)荧光染料标记 Anti-CD8 抗体或其它抗体;3)离心机、流式细胞分选仪等。(二)基本操作流程细胞准备1.外周血单核细胞、脾细胞、淋巴细胞、常规细胞系细胞等,以 2-5×107/ml 的密度重悬于 FACS Buffer(PBS+ 2%
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