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200UL
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文献和实验Direct/Indirect Staining Protocol
-Fc receptor) for mouse cells, 10% goat, mouse, or rabbit serum for human cells. Incubate 5-10min at Room Temperature. 4) Add 10uL of appropriate diluted antibody to each tube (dilution is determined by antibody titration ). Incubate for 20
基磺酰氟0.1mM。蔗糖20%(g/v),氯化钠200mM,过滤灭菌,100ml培养物/5ml细菌周质腔蛋白提取液),振荡混匀,置于4℃轻摇1小时,12000rpm,4℃离心20分钟,取上清。将提取物用PBS透析过夜,在FPLC上,用0.01M PBS pH7.4平衡Protein G Agarose 亲和层析柱,上样,先用0.01M PBS pH7.4平衡,至基线稳定后,用0.1M pH2.8甘氨酸缓冲液洗脱,收集洗脱液。7、Fab和F(ab)2竞争免疫荧光结合实验将浓度为4ug/ul的HI47溶液与1106
磁力搅拌器上搅拌30分钟,再进行超声破菌,我的超声条件是:功率400W,工作2秒,间隔2秒,重复199次。菌体来自500 ml培养物,用30 ml PBS重悬,超声效率还是可以的。 哪儿的溶菌酶好用? 我用生工的溶菌酶,称取干粉20mg。200ml菌液用18 ml NaCl重悬,加入2 ml 25mM Tris-HCl(pH8.0),将溶菌酶干粉加入体系,混匀,测pH降低到5-6,加20 ul 2M Tris碱,体系pH升到~8。4C放置1小时,菌液上层变澄清,摇动发现体系没有变粘。测pH
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