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文献和实验Science:性经验如何引起大脑内部状态改变?李莹课题组发现关键神经环路
发现,与无性经验和交配能力恢复的小鼠相比,处于性饱足状态小鼠具有更多 BNSTEsr2 神经元表现出更高兴奋性。进一步研究发现,处于性饱足状态下的雄性小鼠 BNSTEsr2 神经元会表达更多 Hcn1 通道,而该现象在雌性小鼠中并不显著。使用 CRISPR/Cas9 技术在 BNSTEsr2 神经元选择性敲除 Hcn1 基因,雄性小鼠表现出明显的性饱足状态缺失 (图 3)。 图 3. CRISPR/Cas9 介导 BNSTprEsr2 神经元中 Hcn1 敲除后,雄性小鼠能够持续交配。 综上所述
Fractionation of Nuclear and Cytoplasmic RNA by Trizol--分别提取细胞核和细胞质RN
at RT. 6: Transfer cytoplasmic fraction to a new tube, put nuclear samples on ice now. 7: To cytoplasmic fractions, add 0.9ml 1.2xTRIzol reagent. Vortex to mix completely, sit at RT for 5 minutes. 8: Add 200ul chloroform:IAA 200ul per 1ml TRIzol
MHC I STREPTAMERS® 检测与分离抗原特异性 (CD8+ T) 细胞
浓度为 1x107cells/ 100 μl,从中取 1 - 2x106 cells; 2. 用去离子水将 10xBuffer IS 稀释为 1x,准备 3 ml 稀释后的 Buffer IS; 3.取 1ul Strep-Jactin®PE 或 Strep-Tactin®APC,0.8μl MHC I-Strep,与 1x Buffer IS 混匀为 10ul 的终体积,冰上孵育 45 分钟; 4.将上一步孵育完的 Streptamers 复合物加入到细胞悬液中轻轻吹打混匀,冰上孵育 45 分钟
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