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文献和实验, 0. 1mM 苯甲基磺酰氟(DMSF ) , 5mM B2巯基乙醇, 0. 5% CHA P s(Pierce) 和10% 甘油。 (3)冰育30 分, 然后在超速离心机中离心30 分钟。 (4)去上清, 液氮速冻沉淀, 裂解细胞于-80℃保存。 二、扩增 (1)在微量管中冻干0. 1ug 荧光标记的cx反转引物, 蜡封(5′CCC TTA CCC TTA CCC TTA CCC TTA 3′)。 (2)于蜡界之上加50ul TRA P 反应物, 包括T ris-Cl (pH8. 3) 20
分离培养大鼠或小鼠小脑神经元 Dissociated Cultures of Cerebellar Neurons
HHGN 500ml 1X HBSS 50ml 10X [without Ca, Mg; Gibco/BRL # 14180-020] 2.5mM Hepes pH 7.3-7.5 1.25 ml 1M glucose 7ml 2.5M (45%) NaHCO3 2ml 1M store at 4C (approx 2 mo.) DNAase
20X SSC Glycerol (enzyme grade) Sodium Acetate (tri-hydrate) Boric Acid Sodium Hydroxide (1M) Glacial Acetic Acid Succinic anhydride, #23969-0 and 1-methyl-2-pyrrolidinone, # 32863-4 (Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO) Diethyl
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