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文献和实验, 0. 1mM 苯甲基磺酰氟(DMSF ) , 5mM B2巯基乙醇, 0. 5% CHA P s(Pierce) 和10% 甘油。 (3)冰育30 分, 然后在超速离心机中离心30 分钟。 (4)去上清, 液氮速冻沉淀, 裂解细胞于-80℃保存。 二、扩增 (1)在微量管中冻干0. 1ug 荧光标记的cx反转引物, 蜡封(5′CCC TTA CCC TTA CCC TTA CCC TTA 3′)。 (2)于蜡界之上加50ul TRA P 反应物, 包括T ris-Cl (pH8. 3) 20
AFLP: not only for fingerprinting, but for positional cloning
as such: MseI-MseI >>> MseI-EcoRI >>> EcoRI-EcoRI. As discussed below we target the MseI-EcoRI and EcoRI-EcoRI fragments for analysis. 2) Specific ds oligonucleotide adapters (~ 25-30 bp) are ligated to the restricted DNA fragments. 3) Oligos homologous
AFLP: not only for fingerprinting, but for positional cloning
as such: MseI-MseI >>> MseI-EcoRI >>> EcoRI-EcoRI. As discussed below we target the MseI-EcoRI and EcoRI-EcoRI fragments for analysis. 2) Specific ds oligonucleotide adapters (~ 25-30 bp) are ligated to the restricted DNA fragments. 3) Oligos homologous
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