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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- 45-4321-80
- 2025年06月24日
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100
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25UG
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文献和实验Access RT-PCR System (Promega)
primer (50 pmol)2.5downstream primer (50 pmol)2.5RNA (0.5-1 ug)final volume25Additional water1. Determine the amount of RNA that you will add to deliver 0.5 ug, and enter the value in the table.Sample name: _____________________OD 260
设定好的条件开始循环。 四：条件 50° 30min,95° 15min .(94° 45s,Tm-5°,72° 1min)*35cycle ,72° 10min ,----4° 待PCR仪中的温度降到4°时，取出RT-PCR产物，电泳，并置于-20°冰箱保存
两对引物进行扩增，不是一个概念，它是拿第一次的PCR产物，稀释100-1000倍做模板，加入底物，从新进行扩增反应，以期增加产物的量我做RT-PCR时,提总RNA时,都是用灭菌DEPC水,按1:100稀释后测OD260和OD280,后根据公式:RNA浓度=OD260*稀释度/25(ug/ul),后用1mg total RNA分离mRNA.做逆转录及PCR,效果很好.我有一个问题请教，RT-PCR要求模板RNA的260nm/280nm的比值最低为多少，如果太低是不是会影响结果？最低到1.8，最好
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