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25UG
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文献和实验一、细胞裂解的准备 (1)1×107 细胞重悬, 其来源可为新鲜样品或贮存于- 80℃ 1mo l 冰冻清洗缓冲液中 的无DM SO 的样品, 冰冻缓冲液包括10mM HEPES (pH7. 5), 1. 5mM M gCl2, 10mM KCl, 1mM 二硫苏糖醇(DTT ) , 然后离心(16 000rpm、4℃、1m in)。 (2)重悬细胞团于100ul 冰冻裂解缓冲液, 其包含10mM T ris-HCl (pH7. 5) , 1mM MgCl2, 1mM EGTA
前将 A 与 B 按 1 : 9 混匀即可。 (2 )砷钼酸试剂 :25g 钼酸铵[( N H 4 ) 6 Mo 7 0 24 . 4H 2 0 ]溶于 450ml 蒸馏水中(加热溶解,但温度接近 150 ℃时易分解),待冷却后再加入 21 ml 浓 H 2 SO 4 混匀。另将 3g 砷酸氢二钠( Na 2 HAs0 4 . 7H 2 0) 溶解于 25ml 蒸馏水中,然后加到钼酸铵溶液中,室温下放置于棕色瓶中可长期备用。 (3 ) 200ug/ml 葡萄糖标准液:准确称取分析纯葡萄糖 200mg
/L将其稀释到1mo/l即可 标准蛋白质溶液:精确称取结晶牛血清蛋白3mg溶于双证水中,定容于10ML,浓度为0.3mg/ml 3实验方法:1。取16mm*150mm试管13支,标明号码,放置与试管架,在1-11号试管中分别加入标准牛蛋白血清(0.3mg/ml)0,0.1,0.2--------1.0ml,补足双蒸水至每管体积1.0ml,在12,13管中加入待测样品100UL,并补足双蒸水至1。0ml 3. 加入5.0ml新配置的试剂甲,立即混匀,在室温下放置10分钟 4. 各管中
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