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文献和实验大家给看看,问题出在哪里?谢谢各位!!! 附: 枯草芽孢杆菌电转化方案 1 感受态细胞的制备 1.1 从新鲜培养的平板上接种一单菌落至3 ml B2液体培养基中,试管(17×100 mm)。 1.2 250 rpm,37℃培养过夜(16 h)。 1.3 接种1.5 ml过夜培养的种子至150 ml(装于1L的三角瓶中)新鲜的B2培养基中,200 rpm,37℃培养,至菌数达到~1×108 cells/ml。 1.4 将菌液冰水浴15 min,然后转移至250 ml的离心杯中,12
相关专题 1.G418的配制 : 方案一: 300mgG418加入3ml PBS 溶液,浓度为100mg/ml,完全溶解后,0.22um 过滤,-20℃保存。 方案二:(1)配制1M HEPES:23.8g HEPES(缓冲能力更强)粉末溶于100ml ddH2O,10N NaOH(加量较多)调节pH至7.3,过滤除菌 (较难过滤),4℃保存,终浓度为1mol/L。 (2)5g
Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
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