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文献和实验,PE 50T/100T 1000/1500 L0114 Mouse anti-Human CD45RA mAb,Biotin 50T/100T 800/1200 L0115 Mouse anti-Human CD45RA mAb,Biotin 100ug/500ug
Intracellular Cytokine Staining Protocol
28 (2ug/ml soluble) 5hrMonensinJES5-16E3IL-12mouse PECmIFNg (100ng/ml) (2hr)/LPS (100ng/ml) (22hr)2hr/22hr-MonensinC17.8GM-CSFmouse spleenConA (3ug/ml) (2d)/IL-2 (20ng/ml)+IL-4 (20ng/ml) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/ml immobilized)+anti-CD28 (2ug/ml soluble
一、细胞裂解的准备 (1)1×107 细胞重悬, 其来源可为新鲜样品或贮存于- 80℃ 1mo l 冰冻清洗缓冲液中 的无DM SO 的样品, 冰冻缓冲液包括10mM HEPES (pH7. 5), 1. 5mM M gCl2, 10mM KCl, 1mM 二硫苏糖醇(DTT ) , 然后离心(16 000rpm、4℃、1m in)。 (2)重悬细胞团于100ul 冰冻裂解缓冲液, 其包含10mM T ris-HCl (pH7. 5) , 1mM MgCl2, 1mM EGTA
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