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- 赛默飞（Thermo Fisher）
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- 2025年07月15日
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文献和实验一、细胞裂解的准备 (1)1×107 细胞重悬, 其来源可为新鲜样品或贮存于- 80℃ 1mo l 冰冻清洗缓冲液中 的无DM SO 的样品, 冰冻缓冲液包括10mM HEPES (pH7. 5), 1. 5mM M gCl2, 10mM KCl, 1mM 二硫苏糖醇(DTT ) , 然后离心(16 000rpm、4℃、1m in)。 (2)重悬细胞团于100ul 冰冻裂解缓冲液, 其包含10mM T ris-HCl (pH7. 5) , 1mM MgCl2, 1mM EGTA
其次了。 长度：这和eeflying意见相左啊，大家别信我的。我们认为500之内比较好，不受中间可能出现的各种序列和二级结构的影响。至于eeflying说的跑的在前会弥散则可以用2％的胶就行了。我一般是250(真形象)左右。目的基因和内参照之间的大小比例可以根据爱好和胶的浓度、分辨率调整的。如果是250，则相差100bp很好，如果4、500则差个200bp也可以。 内参照：看家本事来了（狂吐先～，嗯，好点了），（这是回答maria的帖子）一定要做内参的，每一次，我想。不作内参的结果是不可信的，实际上，半定
The following protocol is designed for subcloning inserts (I) from one vector into another vector (V). The inserts can be anywhere from 30 bp to 8 kb (possibly higher). Perform restriction digests
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