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文献和实验Staining Methods for cell death Z. Xia 10/2/95
gently tilt the plates to mix R.T. 15 min Aspirate off media Staining: 4 ug/ul P. I./0.1 % triton X-100/0.5 mg/ml RNaseA in PBS R.T.5 min Examine under the scope or mount with coverslips Note: P
RNA Purification Protocol for 10-20mg of Animal Tissue
. The precipitated protein and DNA will form a tight pellet. 6. Transfer the supernatant to a new sterile 1.5 mL centrifuge tube that containing 600ul of 100% isopropanol. If the RNA yield is expected to be low, add total 1ug Linear Polyacrylamide (Cat# PR033
性非常强的抗体,可以避免高背景和不理想的蛋白定位结果。在大多数情况下,纯化抗体的效果很好,但是正确的对照可以帮助精准定位抗原。使用只有二抗染色的片子作为阴性对照,有利于减少降低背景干扰。 3. 合适的抗体稀释比例 通过优化抗体稀释比例来优化染色,通常情况下 1ug/ml 的纯化抗体或者 1:100-1:1000 的抗血清足够达到特异性染色的结果。但在能保证低背景染色的前提下,可以通过增加浓度来提高信号强度。如果是第一次使用该抗体或测定某抗原,强烈建议浓度梯度实验。 4. 优化
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