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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- 16-4301-025
- 2025年07月14日
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- 文献和实验
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100
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25 MG
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文献和实验定量RT-PCR （Quantitative RT-PCR）
(8.5 ml per well =1 mg per well).b. Add 1 ml of the diluted control RNA in each well in the order of 10 ng, 1 ng, 100 pg, 10 pg, 1 pg, 100 fg, 10 fg, 1 fg. c. Add 10.5 ml reverse transcription mixture to each well. RT mixture: 3' antisense primer
； （3）缓冲液洗涤10min，3次； （4）加碱性磷酸酶标记的羊抗地高辛抗体复合物，37℃，2h； （5）缓冲液洗涤5min，3次； （6）NBT、BCIP暗处显色，镜下控制，终止显色。 （7）常规脱水：透明、封固。 2、原位RT-PCR步骤 1）预处理： （1）蛋白酶K(0.3mg/mL) 54℃消化20min，蒸馏水洗； （2）95℃加热3min，灭活残存的蛋白酶。 2）原位扩增： （1）在有RNA酶抑制剂存在的条件
【分享】RT-PCR Protocol (Reverse Transcriptase-PCR)
PROCEDURE FOR cDNA SYNTHESIS ON DYNABEADS oligo(dT)25 (5/4/94) 1. Dissolve RNA (30 ug) in 10 ul H20, add 20 ul TE/1M KCl. 2. a) Place 100 ul Dynabeads oligo(dT)25 (5 mg/ml) in a 0.5 ml tube. b) Bind beads. c) Remove liquid. d) Add 100 ul TE/1M KCl. e
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