GOXMS IGG F2 H+L FITC PAB-100

荧光素FITC标记抗体的方法

min。②荧光素的准备 根据欲标记的蛋白质总量，按每毫克免疫球蛋白加0．01mg荧光色素，用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末。也可用下述公式计算出免疫球蛋白、荧光素的量，还可以算出需加缓冲液的量。a．蛋白溶液：含量Amg／m1；容积Bml。b．总蛋白量(AXB)＝Crag。c．C／20～C／10＝Dmg(如蛋白含量低于20mg／ml，用C／10；如高于20mg／ml，用C／20)。d．荧光素FITC的量：(1／50～2／100)XC＝Emg。e．巳0．5mol／L(pH9．5)碳酸盐缓冲

FITC荧光二抗？――EarthOx新型DyLight 488绿色荧光

的价格比常规二抗 只高20%左右，但是Dylight的效价通常是常规荧光二抗的2-4倍左右，因此就最终的性价比，Dylight更胜一筹。举例来说，EarthOx的 FITC标记的山羊抗小鼠IgG二抗（货号为E031210），100μl和500μl报价分别是￥160和￥640；而相应的EarthOx的 Dylight 488标记的山羊抗小鼠IgG二抗（货号为E032210），100μl和500μl报价分别是￥200和￥800，但是在具体使用时，比如免疫荧光实验，其推荐稀释比率分别为1:100

荧光素FITC标记抗体的方法（Marsshall法、Chadwick法、改良法、透析标记法）

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下 FITC-N=C=S + N-H 2 -蛋白质 → FITC-NS-C-N-H 2 -蛋白质 常用