2-氯-N'-羟基-4-吡啶甲酰亚胺,2-Chloro-N'

利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化

结果。 ( 5 ) 我们曾对在表层镀膜的 FAST 片基上（表层被硝化纤维来源的聚合物所覆盖）和环氧树脂片基上固定的变性蛋白质进行磷酸化处理，尽管含组氨酸标记蛋白质在这两个片基表层上可被抗 RGS-His6 的抗体检测到，但我们仅在 FAST 片基上检测到蛋白质磷酸化。在其他研究中，纳米井，BSA-NHS ( BSA-N-羟基丁二酰亚胺）片基或 SAM2 ( 抗生物素蛋白链菌素包被膜）片基在芯片激酶实验中都可以被用作表面镀膜涂层。我们综述了不同的芯片表层在包括磷酸化研究在内的不同芯片应用 [31] 。 ( 6 ) 在磷酸

环肽的合成方法

反应。几乎所有可用于偶联反应的活泼酯都可用于合成环肽，主要有对硝基酚酯、N-羟基琥珀酰亚胺酯、五氟苯酯和2，4，5-三氯苯酚酯。线性多肽的C端羧基与对硝基酚、N-羟基琥珀酰亚胺、五氟苯酚或2，4，5-三氯苯酚，在DCC或其他缩合剂存在下，于低温反应，很容易得到相应的活泼酯。这种N端通常带有BOC或Z保护的活泼酯在酸性条件下脱去保护基，形成活泼酯的氢卤酸盐，在弱碱性稀溶液中，如在吡啶，DMF或二氧六环一类介电常数较大的溶剂中，保持pH8～9，加热（60～100℃）或室温搅拌数小时至数日，最终可得到环肽

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

) 为标准 样品，发现这种方法比被动洗脱的效果好。当凝胶上样量为5jug 时，回收效率分别为： BSA   8 9 % 和 PhosB 5 8 % ^ 被 动 洗 脱 （ 将捻碎的蛋白质条带浸泡在I X 电泳缓冲液过夜） 无法回收到磷酸酶B ，并且只能回收加样的 B S A 的 39 %   ( 表 27-1)。在 进 行 MALDITOF  M S 之前，将浓缩蛋白质与基质共结晶，进一步去除残留杂质。混合蛋白质溶液 和基质溶液[芥子酸，l 〇 mg/m L 溶于乙腈/水 （3  :  7)]，置