相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
武汉恩玑生命科技有限公司
- 规格:
20mL/50mL/100mL
| 规格: | 20mL | 产品价格: | ¥320.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mL | 产品价格: | ¥680.0 |
| 规格: | 100mL | 产品价格: | ¥1320.0 |
产品概述
从细胞或组织中提取到完整的蛋白质样品是影响免疫印迹分析(Western blotting,WB)得到真实可靠结果的关键因素之一。本产品是专为获取完整蛋白质样本而设计的革命性解决方案,突破传统RIPA裂解液及超声破碎的技术局限,可以快速完整的提取细胞和组织中蛋白质,并有效保护蛋白质的化学修饰,尤其适用于大分子蛋白及翻译后修饰蛋白的提取,为Western blot等蛋白质分析实验提供优质样本保障。
产品组分
|
规格 |
组分A |
组分B |
|
RC0005-S |
40 μL |
20 mL |
|
RC0005-M |
100 μL |
50 mL |
|
RC0005-L |
200 μL |
100 mL |
产品特性
• 完整抽提大分子蛋白质。
• 保护蛋白质翻译后修饰(如磷酸化、糖基化、泛素化、甲基化和乙酰化)。
• 一步到位,无需添加酶抑制剂。
• 兼容细胞与组织样本。
验证数据
• 大分子蛋白提取对比实验

图A:分别使用RC0005裂解液和RIPA buffer裂解HeLa细胞,并使用mTOR(289 kDa)抗体进行蛋白免疫印迹,裂解物上样量为50μg,结果显示RC0005处理后的大分子蛋白丰度更高。
图B:分别使用RC0005裂解液(分别裂解30min、15min、5min)和超声方案对HT1080细胞进行裂解,并用SMRT抗体(270,160 kDa)进行蛋白免疫印迹,裂解物上样量为50μg,结果显示超声处理将SMRT破坏为多个小片段蛋白,RC0005在不同的处理时间下,都保留了蛋白的完整性。
• 蛋白质翻译后修饰对比实验

分别使用RC0005和RIPA对Hela细胞进行裂解,用O-GlcNAc(糖基化)抗体对细胞裂解物进行蛋白免疫印迹(平行组),裂解物上样量为50μg,结果显示RC0005处理的样本糖基化修饰的蛋白丰度存在明显优势。
• 样本兼容性实验

图A:使用RC0005裂解 HeLa 细胞和小鼠大脑组织(各2组样本),用mTOR (289 kDa)抗体对裂解物进行免疫印迹,裂解物上样量为50μg。
图B:使用RC0005裂解 HeLa 细胞和小鼠大脑组织(各2组样本),用GAPDH(37kDa)抗体对裂解物进行免疫印迹,裂解物上样量为50μg。
数据显示RC0005对细胞样本和组织样本均有优秀的裂解效果,同时兼容不同大小的蛋白样本。
产品储存
试剂 A 存放于-20°C 冷冻条件,试剂 B 存放于室温或 4°C 冷藏条件。
注:若试剂 B 在 4°C 下长时间保存,可能会出现沉淀,这不影响产品质量。当移至室温下,沉淀会重新溶解。
产品应用
大分子蛋白的提取;修饰性蛋白(糖基化、磷酸化、泛素化等)的提取;免疫印迹分析
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验体,后续培养后收集的细胞上清中的外泌体不确定是从细胞分泌的还是血清中来的,影响结果的准确性。 2. 营养:细胞培养是需要一定的营养的,那么如果不加血清,单独只用基础培养基,就会导致细胞处于饥饿状态,严重影响细胞生长,甚至出现吞噬外泌体的现象,影响实验结果。 3. 杂蛋白:去外泌体胎牛血清可以很好地解决 1、2 中涉及的问题,但还会存在杂蛋白影响蛋白定量结果,导致数据偏高,影响后续实验的准确性。如果使用外泌体专用无血清培养基(专门针对外泌体获取的培养基,化学成分明确,类似于完全培养基的一种
培养 24 - 48 h,细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基: 待细胞汇合度~50%时,移去原有完全培养基,添加新培养基进行培养,新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成; 待细胞生长汇合度约为70-80%时,移去培养基; 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次; 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h,待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液,该上清液即可用于外泌
一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的,去外泌体血清难以做到 100% 的去除的,因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体,而外泌体专用无血清培养基,也不是适合所有的细胞,常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长,而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了,所以也需要一些预实验的摸索。 还有,那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢?这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下,是处于饥饿状态的,细胞会将培养
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










