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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
160
- 英文名:
Escherichia coli BL21(DE3)(pET-32a(+)-ORF8)
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
西林瓶
中文名称:BL21(DE3)(含pET-32a(+)-ORF8质粒)大肠杆菌
英文名称:Escherichia coli BL21(DE3)(pET-32a(+)-ORF8)
形式:西林瓶
参考用途:pET-32a(+)-ORF8质粒提取。 基因种属: SARS-CoV-2
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
生长条件:37℃;18-24h;好氧;
存储条件:-20℃
安全等级:1
操作步骤:
1. 准备无菌液体试管 1 支(含培养基 5~10mL),90mm 平板 2 块;
2. 西林瓶管壁消毒后,无菌环境下,依次打开铝盖与胶塞,吸取约 0.5mL 液体培养基打入瓶中,轻轻吹打溶解菌片;
3. 菌片充分溶解后,将溶解液全部吸出,打回液体试管混匀;
4. 从试管液体中吸取混合液涂布平板,200μL/个;
5. 将试管和平板全部置于上述指定条件培养,禁止密封缠绕平板,18-24h 后观察培养液明显浑浊,平板菌落或菌苔生长;
6. 如菌种未生长,应继续培养至 72h,培养好后按照试验需求具体使用。
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文献和实验( DE3 )表达的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌与氨苄抗性质粒相容,可用于 pET-32 载体,硫氧还蛋白标签能够进一步增强在胞浆内形成二硫键。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择,因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Origami B 宿主菌来源于 BL21 lacZY 突变株,还带有与原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突变。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner
表达载体的构建是生物技术和所需蛋白质产生的基本工具,本文总结了pET-32α(+)载体技术的构建,该技术通常用于研究实验室。该方法包括获得用于构建载体的外源DNA片段,将DNA片段亚克隆到pET-32α(+)表达载体中,在大肠杆菌 BL21(DE3)中进行蛋白质表达以及在大肠杆菌中在天然条件下进行蛋白质纯化。裂解液。介绍作为分子生物学实验室中非常有用的实践,重组DNA技术(或基因克隆)是指将DNA片段从一种生物体转移到自我复制的遗传元件如表达载体。然后插入的DNA可以在外源宿主细胞中繁殖
-1,pBADHis, pBADHislacZ,pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒:pCDFduet-1 以及pCDNA3.1,pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta(DE3),Rasettagame(DE3),Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒: pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
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