- ￥950
- YLKBIO
- YLK-ZL0152
- 国产
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
pET-32a(+)-ORF6 plasmid
- 保质期：
90天
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
质粒干粉
产品名称：pET-32a(+)-ORF6质粒
产品规格：质粒干粉
有效期：90天，请尽快转化。
保存温度：一般在-20℃，置于-80℃保存时间更长。
运输方式：常温运输，1周内。
应用领域：科研
生长条件：LB+氨苄青霉素，37℃，克隆菌株BL21(DE3)
注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。（请向客服QQ索要质粒信息目录）
1.溶解： 收到质粒干粉后，请加入 20μl 无菌水至管底，溶解质粒，室温静置 1min；
2.混合（吸附质粒）： 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀，冰上放置 30min；
3.热激导入： 42℃静置 90s；
4.收缩膜孔： 冰浴 2min；
5.修复培养： 毎管加 800μl LB 液体培养基，37 ℃培养 1h 150 r/min；
6.筛选培养： 将适当体积（100 μl）的复苏细胞，涂布在相应抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（琼脂面务必干燥后）， 倒置培养 12-16h，出现菌落。
7.提取： 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中，震荡培养 12-16h，根据试验需要提取质粒。
pET-32a(+)-ORF6质粒培养基：LB+50mcg/ml氨苄青霉素：酵母膏 5.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 10.0g，蒸馏水 1.0L，pH 7.0。121℃，15min灭菌。灭菌结束后，培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素，浓度50mcg/ml。
| pSV40-Cpe-m小鼠基因质粒 |
| pSV40-Mdm2-m小鼠基因质粒 |
| pSV40-Aldoa-m小鼠基因质粒 |
| pSV40-Ctsb-m小鼠基因质粒 |
| pSV40-Pkm-m小鼠基因质粒 |
| pSV40-Tcf25-m小鼠基因质粒 |
| pSV40-Mphosph8-m（1-1255bp）小鼠基因质粒 |
| pSV40-Pycrl-m（9-825bp）小鼠基因质粒 |
| pSV40-Pfkm-m（多了一段）小鼠基因质粒 |
| pSV40-Rbm5-m（1179-2448bp）小鼠基因质粒 |
| pSV40-App-m（742-2088bp）小鼠基因质粒 |
| pSV40-Fam20c-m小鼠基因质粒 |
| pSV40-Hhatl-m(78-1512bp)小鼠基因质粒 |
| pSV40-Plekha3-m小鼠基因质粒 |
| pSV40-Slc25a18-m小鼠基因质粒 |
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文献和实验编码区的基因片段，其由5'末端的stat密码子（ATG）和3'末端的终止密码子（TAA，TAG或TGA）结合。然后将目的基因片段插入pMD18-T载体中以构建重组质粒，通过DNA测序鉴定。用指定的酶消化重组pMD18-T质粒，并通过以下方案将检索到的目的DNA片段亚克隆到pET-32α（+）载体中以产生重组表达载体。将约129bp的TBO基因片段插入pET-32α（+）载体（5900bp）用相同的限制酶在37℃消化pET-32α（+）载体和重组pMD18-T载体1小时，然后通过在65℃温育10分钟
walterxp 各位前辈，我想请问一下pet32a用什么受体菌做表达比较好，我只有DH5α。谢谢 花生剥了壳 可以用Rosetta或者BL21，表达的都挺好。 walterxp 好的谢谢 我用BL21了 guoda11 BL21，我看行！用pET32a作为表达载体，我们实验室很多真核蛋白都实现了可溶性表达！ 本文由丁香园论坛提供，想了解
晚上每天都有人做报告，我觉得让我收获最大的是Bill Studier的报告。本来这个报告是后来才听到的，但是由于Burgess的模块是唯一的涉及大肠杆菌中表达蛋白的，我把这一段提前来说说。Studier这老哥是Brookhaven National Laboratory的，一生研究T7噬菌体，也是T7 RNA polymerase induction system（pET系列质粒）的发明者。 T7系统在大肠杆菌表达蛋白的应用实在太广泛了，但凡表达蛋白的兄弟姐妹们的不可能不知道这个系统
