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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
170
- 英文名:
pcDNA-Ikkb-FLAG WT
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
质粒干粉
英文名称:pcDNA-Ikkb-FLAG WT
形式:质粒干粉
参考用途:小鼠基因质粒
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,骨架5428bp+基因大小)
存储条件:2-8℃
安全等级:0
操作步骤:
1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800µl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 µl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
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文献和实验【求助】请教一下各位大虾:质粒pACYC184和pBRM-Wt的具体结构是怎样的呢,从哪可以得到,谢谢!
西点6688 请教一下各位大虾:质粒pACYC184和pBRM-Wt的具体结构是怎样的呢,谢谢! slytjiaofei http://genome-www.stanford.edu/vectordb/vector.html 自己查查吧!!! lastone9853 这两个质粒pACYC184和pBRM-Wt的图谱,序列等可以在网上查到,我这有这两个载体,可以快
于 RACK1。 图 4 EST12 通过 RACK1 诱导 NLRP3 炎症小体的激活 A:qPCR 分析 EST12 蛋白处理的小鼠腹腔巨噬细胞 8 个 PYRIN 结构域蛋白的 mRNA 表达水平;B-C:WB 和共聚焦显微镜检测 EST12 蛋白刺激的 RAW264.7 细胞;D:qPCR 分析 EST12 处理 WT 和 RACK1−/−腹腔巨噬细胞的 NLRP3 mRNA 表达水平;E:IP 和 WB 分析质粒转染后 EST12 刺激的 RAW264.7 细胞;F:WB 分析裂解
的真核表达载体 amp/neo pcDNA 3.1(-) myc-hisC 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA4/HisB 含His标签的真核表达载体 amp/neo pcDNA3 flag 含flag标签的真核表达载体 amp/neo pIRES 一个真核双表达载体,外源序列只要是带有起始密码子和终止密码子就可以进行表达了,载体提供了转录装置PCMV和polyA。载体本身没有阅读框,只有转录起始位点,翻译的起始就由插入序列自己完成了。MCSB的共翻译
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