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pcDNA-Ikkb-FLAG WT质粒干粉

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  • 烜雅生物已认证
  • XY-ZL0174
  • 国产
  • 2025年07月14日
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      170

    • 英文名

      pcDNA-Ikkb-FLAG WT

    • 保质期

      2年

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      质粒干粉

    中文名称:pcDNA-Ikkb-FLAG WT质粒干粉

    英文名称:pcDNA-Ikkb-FLAG WT

    形式:质粒干粉

    参考用途:小鼠基因质粒

    培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)

    生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,骨架5428bp+基因大小)

    存储条件:2-8℃

    安全等级:0

    操作步骤:
    1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
    2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀,冰上放置 30min;
    3.热激导入: 42℃静置 90s;
    4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
    5.修复培养: 毎管加 800µl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
    6.筛选培养: 将适当体积(100 µl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
    7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。

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