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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
250
- 英文名:
pX459 V2.0
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
质粒干粉
英文名称:pX459 V2.0
形式:质粒干粉
参考用途:基因编辑载体
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株Stbl3,动子:U6 复制子:pUC )
存储条件:2-8℃
安全等级:0
操作步骤:
1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800µl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 µl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
2 Cas9 - 2 hitKO 系统三、Cas9 - 2 hitKO 系统中涉及到的载体为了达到高效的敲除效率,我们在同一个载体重引入 cas9 酶和两个向导性 RNA。整个系统包括 3 个载体: PX458M ,PX459M 和 EZ-GuideXH。PX458M ,PX459M 除了含有 Cas9 和一个向导性 RNA 插入位点,还引入第二个向导性 RNA 插入位点。EZ-GuideXH 是为插入第二个向导性 RNA 的辅助性载体。PX458M 带有 EGFP 荧光标记; PX459M 带有
lab 后来推出 lentivirus 版本的 Cas9 质粒系统 (lentiCRISPR v2)。这个系统设计起来和 pX330 一样,但克隆构建使用的酶切位点不同。 文章来源:文章由冰糖授权转载 图片来源:网络
人谷胱甘肽 - 过氧化物酶( GSH-PX ) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本 中谷胱甘肽- 过氧化物酶(GSH-PX ) 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 谷胱甘肽 - 过氧化物酶( GSH-PX ) 水平。用纯化的 谷胱甘肽 - 过氧化物酶( GSH-PX ) 抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包
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