- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P0931
- 2025年07月14日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pUC57-Tac-mCherry-HS-TNFα(rat)
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pUC57-Tac-mCherry-HS-TNFα-r大鼠基因质粒
别称: pUC57-Tac-mCherry-HS-TNFα(rat)
启动子：Tac
复制子: pUC
终止子: rrnB T1 terminator，T7 terminator
质粒分类: 基因文库载体：大鼠基因质粒；大鼠原核质粒
质粒大小：4634bp
质粒标签：N-HA
原核抗性: Amp
筛选标记：红色荧光蛋白mCherry
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：大鼠
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：荧光蛋白：红色
质粒简介
pUC57-Tac-mCherry-HS-TNFα-r质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4634 bp ds-DNA circular SYN 16-八月-2017
KEYWORDS pUC57-Tac-mCherry-HS-TNF-alpha-r
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4634
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 558..586
/note="tac promoter"
/note="strong E. coli promoter; hybrid between the trp and
lac UV5 promoters"
CDS 633..1343
/codon_start=1
/product="monomeric derivative of DsRed fluorescent protein
(Shaner et al., 2004)"
/note="mCherry"
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEG
TQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNF
EDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALK
GEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERA
EGRHSTGGMDELYK"
terminator 1377..1424
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
misc_feature 1471..1568
/note="HS promoter"
RBS 1577..1588
/note="strong bacterial ribosome binding site (Elowitz and
Leibler, 2000)"
CDS 1595..2254
/codon_start=1
/note="TNF-alpha"
/translation="MSTESMIRDVELAEEALPQKMGGFQNSRRCLCLSLFSFLLVAGAT
TLFCLLNFGVIGPQRDEKFPNGLPLISSMAQTLTLTNHQVEEQLEWLSQRANALLANGM
DLKDNQLVVPADGLYLVYSQVLFKGQGCPDYVLLTHTVSRFAISYQEKVNLLSAVKSPC
PKDTPEGAELKPWYEPIYLGGVFQLEKGDQLSAEVNLPKYLDFAESGQVYFGVIAL"
terminator 2274..2345
/note="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 2361..2388
/note="T7Te terminator"
/note="phage T7 early transcription terminator"
rep_origin complement(2815..3403)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3574..4434)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(4435..4539)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgaatt cgagctcggt acctcgcgaa
421 tgcatctaga tcacattcac caccctgaat tgactctctt ccgggcgcta tcatgccata
481 ccgcgaaagg ttttgcgcca ttcgatggtg tccgggatct cgacgctctc ccttatgcga
541 ctcctgcatt aggaaatttg acaattaatc atcggctcgt ataatgtgtg gaatgtctca
601 tgagcggata tttcacacag gaaacagtat tcatggtgag caagggcgag gaggataaca
661 tggccatcat caaggagttc atgcgcttca aggtgcacat ggagggctcc gtgaacggcc
721 acgagttcga gatcgagggc gagggcgagg gccgccccta cgagggcacc cagaccgcca
781 agctgaaggt gaccaagggt ggccccctgc ccttcgcctg ggacatcctg tcccctcagt
841 tcatgtacgg ctccaaggcc tacgtgaagc accccgccga catccccgac tacttgaagc
901 tgtccttccc cgagggcttc aagtgggagc gcgtgatgaa cttcgaggac ggcggcgtgg
961 tgaccgtgac ccaggactcc tccctgcagg acggcgagtt catctacaag gtgaagctgc
1021 gcggcaccaa cttcccctcc gacggccccg taatgcagaa gaagaccatg ggctgggagg
1081 cctcctccga gcggatgtac cccgaggacg gcgccctgaa gggcgagatc aagcagaggc
1141 tgaagctgaa ggacggcggc cactacgacg ctgaggtcaa gaccacctac aaggccaaga
1201 agcccgtgca gctgcccggc gcctacaacg tcaacatcaa gttggacatc acctcccaca
1261 acgaggacta caccatcgtg gaacagtacg aacgcgccga gggccgccac tccaccggcg
1321 gcatggacga gctgtacaag taattaacct aggctgctgc caccgctgag caataactag
1381 cataacccct tggggcctct aaacgggtct tgaggggttt tttgctgaaa cctcaggcat
1441 ttgagaagca cacggtcaca catcggatcc ccgaggtcct tgttgcgaag attgatgaca
1501 atgtgagtgc ttcccttgaa accctgaaac tgatccccat aataagcgaa gttagcgaga
1561 tgaatgcgta ctagagaaag aggagaaata ctagatgtct accgaatcta tgatccgtga
1621 cgttgaactg gctgaagaag ctctgccgca gaaaatgggt ggtttccaga actctcgtcg
1681 ttgcctgtgc ctgtctctgt tctctttcct gctggttgct ggtgctacca ccctgttctg
1741 cctgctgaac ttcggtgtta tcggtccgca gcgtgacgaa aaattcccga acggtctgcc
1801 gctgatctct tctatggctc agaccctgac cctgaccaac caccaggttg aagaacagct
1861 ggaatggctg tctcagcgtg ctaacgctct gctggctaac ggtatggacc tgaaagacaa
1921 ccagctggtt gttccggctg acggtctgta cctggtttac tctcaggttc tgttcaaagg
1981 tcagggttgc ccggactacg ttctgctgac ccacaccgtt tctcgtttcg ctatctctta
2041 ccaggaaaaa gttaacctgc tgtctgctgt taaatctccg tgcccgaaag acaccccgga
2101 aggtgctgaa ctgaaaccgt ggtacgaacc gatctacctg ggtggtgttt tccagctgga
2161 aaaaggtgac cagctgtctg ctgaagttaa cctgccgaaa tacctggact tcgctgaatc
2221 tggtcaggtt tacttcggtg ttatcgctct gtaataatac tagagccagg catcaaataa
2281 aacgaaaggc tcagtcgaaa gactgggcct ttcgttttat ctgttgtttg tcggtgaacg
2341 ctctctacta gagtcacact ggctcacctt cgggtgggcc tttctgcgtt tataaagctt
2401 ggcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca caattccaca
2461 caacatacga gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag tgagctaact
2521 cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt cgtgccagct
2581 gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc gctcttccgc
2641 ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg tatcagctca
2701 ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa agaacatgtg
2761 agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca
2821 taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa
2881 cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc
2941 tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc
3001 gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct
3061 gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg
3121 tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag
3181 gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta
3241 cggctacact agaagaacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg
3301 aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt
3361 tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt
3421 ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgag
3481 attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat
3541 ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc
3601 tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat
3661 aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc
3721 acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag
3781 aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag
3841 agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt
3901 ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg
3961 agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt
4021 tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc
4081 tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc
4141 attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa
4201 taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg
4261 aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc
4321 caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag
4381 gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt
4441 cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt
4501 tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc
4561 acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata ggcgtatcac
4621 gaggcccttt cgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pUC57-Tac-mCherry-HS-TNFα-r大鼠基因质粒
别称: pUC57-Tac-mCherry-HS-TNFα(rat)
启动子：Tac
复制子: pUC
终止子: rrnB T1 terminator，T7 terminator
质粒分类: 基因文库载体：大鼠基因质粒；大鼠原核质粒
质粒大小：4634bp
质粒标签：N-HA
原核抗性: Amp
筛选标记：红色荧光蛋白mCherry
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：大鼠
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：荧光蛋白：红色
质粒简介
pUC57-Tac-mCherry-HS-TNFα-r质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4634 bp ds-DNA circular SYN 16-八月-2017
KEYWORDS pUC57-Tac-mCherry-HS-TNF-alpha-r
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4634
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 558..586
/note="tac promoter"
/note="strong E. coli promoter; hybrid between the trp and
lac UV5 promoters"
CDS 633..1343
/codon_start=1
/product="monomeric derivative of DsRed fluorescent protein
(Shaner et al., 2004)"
/note="mCherry"
/note="mammalian codon-optimized"
/translation="MVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEG
TQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNF
EDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALK
GEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERA
EGRHSTGGMDELYK"
terminator 1377..1424
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
misc_feature 1471..1568
/note="HS promoter"
RBS 1577..1588
/note="strong bacterial ribosome binding site (Elowitz and
Leibler, 2000)"
CDS 1595..2254
/codon_start=1
/note="TNF-alpha"
/translation="MSTESMIRDVELAEEALPQKMGGFQNSRRCLCLSLFSFLLVAGAT
TLFCLLNFGVIGPQRDEKFPNGLPLISSMAQTLTLTNHQVEEQLEWLSQRANALLANGM
DLKDNQLVVPADGLYLVYSQVLFKGQGCPDYVLLTHTVSRFAISYQEKVNLLSAVKSPC
PKDTPEGAELKPWYEPIYLGGVFQLEKGDQLSAEVNLPKYLDFAESGQVYFGVIAL"
terminator 2274..2345
/note="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 2361..2388
/note="T7Te terminator"
/note="phage T7 early transcription terminator"
rep_origin complement(2815..3403)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3574..4434)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(4435..4539)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgaatt cgagctcggt acctcgcgaa
421 tgcatctaga tcacattcac caccctgaat tgactctctt ccgggcgcta tcatgccata
481 ccgcgaaagg ttttgcgcca ttcgatggtg tccgggatct cgacgctctc ccttatgcga
541 ctcctgcatt aggaaatttg acaattaatc atcggctcgt ataatgtgtg gaatgtctca
601 tgagcggata tttcacacag gaaacagtat tcatggtgag caagggcgag gaggataaca
661 tggccatcat caaggagttc atgcgcttca aggtgcacat ggagggctcc gtgaacggcc
721 acgagttcga gatcgagggc gagggcgagg gccgccccta cgagggcacc cagaccgcca
781 agctgaaggt gaccaagggt ggccccctgc ccttcgcctg ggacatcctg tcccctcagt
841 tcatgtacgg ctccaaggcc tacgtgaagc accccgccga catccccgac tacttgaagc
901 tgtccttccc cgagggcttc aagtgggagc gcgtgatgaa cttcgaggac ggcggcgtgg
961 tgaccgtgac ccaggactcc tccctgcagg acggcgagtt catctacaag gtgaagctgc
1021 gcggcaccaa cttcccctcc gacggccccg taatgcagaa gaagaccatg ggctgggagg
1081 cctcctccga gcggatgtac cccgaggacg gcgccctgaa gggcgagatc aagcagaggc
1141 tgaagctgaa ggacggcggc cactacgacg ctgaggtcaa gaccacctac aaggccaaga
1201 agcccgtgca gctgcccggc gcctacaacg tcaacatcaa gttggacatc acctcccaca
1261 acgaggacta caccatcgtg gaacagtacg aacgcgccga gggccgccac tccaccggcg
1321 gcatggacga gctgtacaag taattaacct aggctgctgc caccgctgag caataactag
1381 cataacccct tggggcctct aaacgggtct tgaggggttt tttgctgaaa cctcaggcat
1441 ttgagaagca cacggtcaca catcggatcc ccgaggtcct tgttgcgaag attgatgaca
1501 atgtgagtgc ttcccttgaa accctgaaac tgatccccat aataagcgaa gttagcgaga
1561 tgaatgcgta ctagagaaag aggagaaata ctagatgtct accgaatcta tgatccgtga
1621 cgttgaactg gctgaagaag ctctgccgca gaaaatgggt ggtttccaga actctcgtcg
1681 ttgcctgtgc ctgtctctgt tctctttcct gctggttgct ggtgctacca ccctgttctg
1741 cctgctgaac ttcggtgtta tcggtccgca gcgtgacgaa aaattcccga acggtctgcc
1801 gctgatctct tctatggctc agaccctgac cctgaccaac caccaggttg aagaacagct
1861 ggaatggctg tctcagcgtg ctaacgctct gctggctaac ggtatggacc tgaaagacaa
1921 ccagctggtt gttccggctg acggtctgta cctggtttac tctcaggttc tgttcaaagg
1981 tcagggttgc ccggactacg ttctgctgac ccacaccgtt tctcgtttcg ctatctctta
2041 ccaggaaaaa gttaacctgc tgtctgctgt taaatctccg tgcccgaaag acaccccgga
2101 aggtgctgaa ctgaaaccgt ggtacgaacc gatctacctg ggtggtgttt tccagctgga
2161 aaaaggtgac cagctgtctg ctgaagttaa cctgccgaaa tacctggact tcgctgaatc
2221 tggtcaggtt tacttcggtg ttatcgctct gtaataatac tagagccagg catcaaataa
2281 aacgaaaggc tcagtcgaaa gactgggcct ttcgttttat ctgttgtttg tcggtgaacg
2341 ctctctacta gagtcacact ggctcacctt cgggtgggcc tttctgcgtt tataaagctt
2401 ggcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca caattccaca
2461 caacatacga gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag tgagctaact
2521 cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt cgtgccagct
2581 gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc gctcttccgc
2641 ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg tatcagctca
2701 ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa agaacatgtg
2761 agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca
2821 taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa
2881 cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc
2941 tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc
3001 gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct
3061 gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg
3121 tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag
3181 gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta
3241 cggctacact agaagaacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg
3301 aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt
3361 tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt
3421 ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgag
3481 attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat
3541 ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc
3601 tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat
3661 aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc
3721 acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag
3781 aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag
3841 agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt
3901 ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg
3961 agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt
4021 tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc
4081 tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc
4141 attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa
4201 taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg
4261 aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc
4321 caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag
4381 gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt
4441 cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt
4501 tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc
4561 acctgacgtc taagaaacca ttattatcat gacattaacc tataaaaata ggcgtatcac
4621 gaggcccttt cgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
|
||||||||||
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
pUC57-Tac-mCherry-HS-TNFα-r大鼠基因质粒
￥100 - 1000
