- ￥700
- 烜雅生物
- XY-ZL0020
- 国产
- 2025年12月18日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
170
- 英文名：
pTrc99a
- 保质期：
２年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
质粒干粉
英文名称：pTrc99a
形式：质粒干粉
参考用途：pTrc99a 载体是一种紧密调控的tac启动子载体，可用于在大肠杆菌中表达融合和非融合蛋白。该载体可与pET系统的原核表达载体互补，启动强度稍弱，但更易于表达出活性蛋白，减少形成包涵体的概率。
培养基：酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃)
生长条件：LB +氨苄青霉素，37℃（克隆菌株DH5α，6849bp ,启动子:Trc 复制子:PBR322 终止子:rrnB T2 ）
存储条件：2-8℃
安全等级：1
操作步骤：
1.溶解： 收到质粒干粉后，请加入 20μl 无菌水至管底，溶解质粒，室温静置 1min；
2.混合（吸附质粒）： 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀，冰上放置 30min；
3.热激导入： 42℃静置 90s；
4.收缩膜孔： 冰浴 2min；
5.修复培养： 毎管加 800µl LB 液体培养基，37 ℃培养 1h 150 r/min；
6.筛选培养： 将适当体积（100 µl）的复苏细胞，涂布在相应抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（琼脂面务必干燥后）， 倒置培养 12-16h，出现菌落。
7.提取： 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中，震荡培养 12-16h，根据试验需要提取质粒。
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文献和实验大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
材料 质粒pTrc-99B 大肠杆菌LeuRS 实验步骤 1. 突变体大肠杆菌LeuRS基因的构建 以构建的编码大肠杆菌LeuRS的基因leuS作为模板，利用两步PCR反应扩增得到六个LeuRS变种酶的基因序列(图1)。 第一轮PCR反应的5’和3’引物：引物1和引物4分别具有NcoI和HindIII酶切位点，构建各突变所用的引物如表1所示。PCR反应产物经用NcoI和HindIII
查、基因筛选及图位克隆有益基因的最好材料，也是永久保存基因资源的最好方法之一。 至于作用就太多了，你自己google一下，发现的是你好多做不了，而不是不知道怎么做？ huangyuan62 楼主,请问能交换你的BAC质粒吗？pBACe3.6,pBeloBAC11等都可以。 本人有以下质粒和菌种,可全部用于交换 pET28a,pET32a,pETDsb,pETGST,pETTrx，pTrc—CKS, pGEX4T
6 pSport1 SP6/M13F(-47) T7/M13R pSUPER T7 T3 pTA2 M13F/T7(优先使用M13F） T3/M13R pT-Adv M13F /T7 M13R pTARGET TM pTarget.F(在T7前面）/T7 pTarget.R pTO-T7 T7 T7TER pTRC99a-c pTRC99C-F pTRC99C-R pTriPLEx2 5'pTriPLEx2 T7 pTWIN-1 T7 T7TER(客户确认再用） pUC18(19)/118
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