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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
150
- 英文名:
MG1655 Chemically Competent Cell
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
冻存管
英文名称:MG1655 Chemically Competent Cell
形式:冻存管
培养基:基础培养基(LB):酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。
生长条件:37℃;18-24h;好氧;
存储条件:-80℃
安全等级:1
操作步骤:
1.感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激90秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入900μl不含抗生素的无菌LB培养基,混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4.6000rpm离心3分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
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文献和实验Zymolyase Dissolve in 10% glucose. Store aliquots (25 µl) at 20o C in common freezer for stock solutions Use once and dispose Comments: alternative is to dissolve in SCE, 40% gycerol, 20 mg/ml final. Can use
Oxalyticase Dissolve in 0.1 M NaCl, 0.02% Na azide, 50% glcyerole Store aliquots (1 ml) at 20o C in common freezer for stock solutions 上一篇:ALPHA FACTOR ARREST AND RELEASE 下一篇:GLASS BEADS
摘 要一、人成骨肉瘤MG-63细胞株和成人成骨细胞的培养与分化特性的观察目的:观察人成骨肉瘤MG-63细胞株和正常成人成骨细胞分化的特性。方法:在细胞培养的不同时间,用α-磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;放射免疫法测定骨钙素(BGP)含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测I型胶原、MMP-1、TIMP-1基因mRNA表达;Van GieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果:人成骨肉瘤MG-63细胞株接种培养第7天后I型胶原基因表达较高。MMP-1表达量随时间
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