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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
190
- 英文名:
Escherichia coli DH5α(pET-28a)
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
冻干粉
英文名称:Escherichia coli DH5α(pET-28a)
形式:冻干粉
参考用途:蛋白表达
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,氯化钠:10.0,琼脂:15.0,pH:7.0±0.2(25℃)
生长条件:37℃;18-24h;好氧
存储条件:2-8℃
安全等级:0
操作步骤:
①准备无菌水1支,90mm抗性平板2块;
②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;
③吸取0.5mL无菌水打入冻干管,充分溶解后液涂布抗性平板,200μL/个;
④将抗性平板置于上述指定条件培养18-24h后进行观察(禁止密封缠绕平板);
⑤挑取单菌落接种到50mL液体LB抗性培养基中,37℃摇床培养过夜;
⑥根据实验需求,吸取适量菌液进行质粒抽提。
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文献和实验查、基因筛选及图位克隆有益基因的最好材料,也是永久保存基因资源的最好方法之一。 至于作用就太多了,你自己google一下,发现的是你好多做不了,而不是不知道怎么做? huangyuan62 楼主,请问能交换你的BAC质粒吗?pBACe3.6,pBeloBAC11等都可以。 本人有以下质粒和菌种,可全部用于交换 pET28a,pET32a,pETDsb,pETGST,pETTrx,pTrc—CKS, pGEX4T
其分子间作用力呈显著下降趋势。 在计算机模拟和蛋白质分子设计的基础上,以野生型TFPI基因为模板,用PCR方法引入突变,构建表达质粒pET―28a(+)―TFPI―Mutl和pET―28a(+)―TFPI―Mut4。然后参照野生型TFPI的基因表达、蛋白质复性及纯化方式,用大肠杆菌制备重组的TFPI―Mutl和TFPI―Mut4。试验证实TFPI―Mutl和TFPI―Mut4保持了与TFPI基本相当的抗凝活性,而且半衰期较TFPl分别延长1.62和4.22倍。
法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞:处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子):带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞,用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态,然后与 pUC18质粒共保温,实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因,因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性,用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释,在含氨
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